R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA，可與某些mRNA一端的一段非編碼序列（3'-MTR）結(jié)合，進(jìn)而影響基因的表達(dá)。為研究R-7是否影響家蠶基因B（調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育）的表達(dá)，科研人員將基因B中對應(yīng)3'-MTR的DNA片段與熒光素酶基因（R-7不影響熒光素酶基因的表達(dá)）重組，如圖1所示。將該重組載體導(dǎo)入家蠶胚胎細(xì)胞并檢測其表達(dá)情況，結(jié)果如圖2所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）若圖1表示一個完整的基因表達(dá)載體，則其中至少缺失了

目的基因（或3'-MTR的DNA片段和復(fù)制原點(diǎn)）

目的基因（或3'-MTR的DNA片段和復(fù)制原點(diǎn)）

，其中的熒光素酶基因相當(dāng)于

標(biāo)記基因

標(biāo)記基因

。
（2）要想短時間內(nèi)獲得大量目的基因，需要用到的技術(shù)是

PCR擴(kuò)增技術(shù)

PCR擴(kuò)增技術(shù)

，該技術(shù)利用了

DNA熱變性

DNA熱變性

原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。
（3）圖1中構(gòu)建基因表達(dá)載體時應(yīng)將目的基因插入到位點(diǎn)

2

2

，原因是

目的基因應(yīng)插入啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因

目的基因應(yīng)插入啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因

。
（4）科研人員從圖2所示的實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值（在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光）。實(shí)驗(yàn)組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，對照組1為將重組載體導(dǎo)入不含（或去除）R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，則對照組2應(yīng)該為

將含有熒光素酶基因但不含對應(yīng)3'-MTR的DNA片段的表達(dá)載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中

將含有熒光素酶基因但不含對應(yīng)3'-MTR的DNA片段的表達(dá)載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中

。由圖2結(jié)果推知R-7抑制連接了3′-MTR的DNA片段的基因B表達(dá)的

翻譯

翻譯

過程。