蔗糖是植物光合作用中最先形成的游離糖，蔗糖轉運蛋白在蔗糖的跨膜轉運等過程中起重要作用。目前，在擬南芥中已經鑒定出9個蔗糖轉運蛋白基因。以AtSUC3、AtSUC5純合單突變體為親本，采用傳統雜交法并結合PCR技術獲得AtSUC3和AtSUC5純合雙突體。
（1）科研人員構建含已知序列T-DNA片段的

重組DNA分子（重組質粒、重組載體）

重組DNA分子（重組質粒、重組載體）

，轉化野生型擬南芥，導致被插入基因發生

基因突變

基因突變

，篩選和自交得到了2種純合突體AtSUC3和AtSUC5。
（2）為研究AtSUC3和AtSUC5基因的傳遞規律，上述2種純合突變體雜交得F₁，F₁自交獲得F₂．依據AtSUC3、AtSUC5、T-DNA片段（完整的T-DNA過大，不能完成PCR）序列設計引物分別為Ⅰ～Ⅶ（如圖所示）。

①PCR1利用引物

Ⅰ、Ⅳ

Ⅰ、Ⅳ

（填寫引物代號）可克隆AtSUC5，標記為A；PCR2利用引物

Ⅰ、Ⅴ

Ⅰ、Ⅴ

（填寫引物代號）可克隆被T-DNA插入的AtSUC5，標記為a；PCR3克隆AtSUC3，標記為B；PCR4克隆被T-DNA插入的AtSUC3，標記為b。
②部分F₂植株的PCR情況見表

基因型	i	ii	iii	iv	v
PCR1	+	-	+	？	…
PCR2	+	+	-	？	…
PCR3	+	+	-	？	…
PCR4	+	-	+	？	…
“+”有PCR產物“-”無PCR產物

表中i植株的基因型為

AaBb

AaBb

（用A、a、B、b表示）。若表中iv植株為AtSUC3/AtSUC5雙突變純合子，其對應的PCR1～PCR4結果依次為

-+-+

-+-+

（用“+”或“-”表示）。若AtSUC3/AtSUC5雙突變純合子在F₂所占比例為n²（n²遠遠小于

1

16

），則親本型配子的比例為

1-2n

1-2n

，說明AtSUC3與AtSUC5的位置關系為

位于（一對）同源染色體上

位于（一對）同源染色體上

。
（3）擬南芥的果實為角果，成熟后可自然開裂傳播種子。進一步研究發現，AtSUC3純合突變體的角果開裂率較野生型明顯降低，AtSUC3/AtSUC5雙突變純合子角果開裂率介于兩者之間，說明AtSUC3、AtSUC5基因功能關系為

拮抗

拮抗

（選擇填寫“協同”或“拮抗”），共同控制擬南芥種子的傳播。