Leber遺傳性視神經病是一種嚴重的遺傳病，患者線粒體內的ND4基因發生突變，患病基因由母親傳給孩子。目前常用“三親嬰兒”的方法幫助女性患者生下健康嬰兒。“三親嬰兒”需取志愿者的去核卵細胞作為細胞質的來源，構建健康受精卵的流程簡圖如圖1。回答下列問題：
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（1）“三親嬰兒”的誕生需依次用到核移植、體外受精體外受精、胚胎體外培養和 胚胎移植胚胎移植等技術，屬于有性生殖。該過程不能直接用女方的體細胞作為核供體的原因是 體細胞中含2套染色體組體細胞中含2套染色體組。
（2）某研究小組欲克隆ND4基因并研究其表達的蛋白，選用了下圖所示的質粒進行實驗。利用PCR擴增基因時，應當挑選的引物是 引物2和3引物2和3（從圖2引物中挑選）。為使目的基因的PCR產物能被限制酶切割，可通過引物使得PCR產物兩端帶上限制酶酶切位點，據圖判斷，質粒上所示的限制酶酶切位點中不能挑選的是哪幾個？BCDBCD（A．BamHⅠB．XhoⅠC．HindⅢD．XbaⅠ）。
（3）獲得重組質粒后，可將其導入經 Ca2+Ca2+處理過的大腸桿菌。除了用四環素篩選外，還可通過 PCRPCR技術確認大腸桿菌中是否轉入了ND4基因。
（4）為使ND4基因在大腸桿菌內高效表達，所用啟動子應選擇 細菌細菌（填“細菌”或“真核細胞”）的，這樣有利于大腸桿菌的RNA聚合酶與之結合。用 液體液體培養基對含ND4基因的大腸桿菌進行擴大培養，合成ND4蛋白。已知ND4蛋白為胞內蛋白，若要提取ND4蛋白，需對擴大培養的菌體進行 離心（沉淀、過濾）離心（沉淀、過濾）操作，并進一步破碎細胞以分離提純ND4蛋白。為探究ND4蛋白在細胞內的分布，需制備針對ND4蛋白的 單克隆抗體單克隆抗體。
（5）實驗完成后，剩余細菌、使用過的培養基等均需經 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌處理再統一廢棄，原因是 防止微生物污染環境防止微生物污染環境。
【答案】體外受精；胚胎移植；體細胞中含2套染色體組；引物2和3；BCD；Ca2+；PCR；細菌；液體；離心（沉淀、過濾）；單克隆抗體；高壓蒸汽滅菌；防止微生物污染環境
【解答】
【點評】
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發布：2024/5/21 8:0:9組卷：12引用：1難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6