啟動子可分為組成型啟動子和誘導型啟動子。35S啟動子是組成型啟動子，能夠持續、高效地啟動目的基因在植物各種組織中表達，但往往也會阻礙植物的生長發育；Rd29A啟動子是一種逆境誘導型啟動子。沙冬青脫水素基因（AmDHN基因）能使植株具有較強的抗旱作用。科研人員構建Rd29A啟動子驅動AmDHN基因表達的載體，過程如圖1，再利用農桿菌轉化法轉化“敖漢苜蓿”培育耐旱新品種，以期在干旱地區發展苜蓿產業。請回答下列問題：
注：neor是新霉素抗性基因，aadA是鏈霉素抗性基因。
（1）Rd29A啟動子的基本組成單位是脫氧核苷酸脫氧核苷酸；能識別啟動子的酶是RNA聚合酶RNA聚合酶。
（2）科研人員擴增Rd29A啟動子所設計的引物如下，根據引物的堿基序列及限制酶的識別序列分析，構建載體2時選用的限制酶是SmaⅠ和SacⅠSmaⅠ和SacⅠ。
上游引物P1：5'-GACCCGGGTTTCCAAAGATTTTTTTC-3'
下游引物P2：5'-GAGAGCTCTGGGGTTTTGCTTTTGAATGT-3'
（3）選用BclⅠ、SacⅠBclⅠ、SacⅠ酶切割載體1、2，構建載體3的成功率較高。研究人員在保存目的基因AmDHN時，構建載體4導入大腸桿菌的優點有①②④①②④。
①穩定保存
②準確復制
③快速表達
④方便取用
（4）載體5需先轉入農桿菌農桿菌后再轉化苜蓿，轉化后應在培養基中添加新霉素新霉素篩選轉化成功的愈傷組織。
（5）為檢測轉基因苜蓿中AmDHN基因的轉錄水平，挑選10株轉基因植株，利用自來水和20%PEG（模擬干旱條件）處理8h,提取RNA通過RT-PCR檢測AmDHN基因和MtActin基因（一種骨架蛋白基因）的表達水平，其結果如圖2：
①選擇MtActin基因轉錄水平作為參照的依據是MtActin基因在各種細胞中表達相對恒定。
②自來水處理和20%PEG條件下的AmDHN基因表達水平的差異說明干旱能誘導Rd29A啟動子啟動轉錄干旱能誘導Rd29A啟動子啟動轉錄。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】脫氧核苷酸；RNA聚合酶；SmaⅠ和SacⅠ；BclⅠ、SacⅠ；①②④；農桿菌；新霉素；干旱能誘導Rd29A啟動子啟動轉錄
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：21引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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