丙酮酸羧化酶（PEP）和乙酰輔酶A羧化酶（ACC）是控制油菜中蛋白質與油脂比例的關鍵酶。PEP反義基因是指反向連接在啟動子之后的PEP基因，其轉錄的mRNA與PEP基因轉錄的mRNA互補，從而抑制PEP基因的表達，提高油菜籽中的油脂含量。圖甲為某種質粒的結構，其中npt-Ⅱ為新霉素抗性基因，gus基因控制合成的酶能使β-葡萄糖苷酸水解為藍色物質，BamHⅠ、SacⅠ為限制酶，圖乙為PEP基因的結構，圖丙為丙酮酸的部分代謝過程。
回答下列問題：
（1）質粒中的T-DNA的作用是 轉移到被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的染色體DNA上轉移到被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的染色體DNA上。
（2）為方便將PEP反義基因與質粒連接，一般將限制酶的識別序列連接到引物上，由圖甲、乙可知，與PEP基因下游結合的引物 5′5′（填“3′”或“5′”）端中應加上 BamHⅠBamHⅠ（填“BamHⅠ”或“SacⅠ”）識別序列。
（3）在轉化農桿菌時，將PEP反義基因表達載體導入處于 能吸收周圍環境中DNA分子能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態的農桿菌中，培育一段時間后，涂布到含有 新霉素和β-葡萄糖苷酸新霉素和β-葡萄糖苷酸的平板上，最終在平板上長出白色和藍色兩種菌落，其中符合要求的是 白色菌落白色菌落。
（4）由圖丙可知，還可通過 對油菜的PEP基因進行敲除使其失效對油菜的PEP基因進行敲除使其失效（答出1種即可）方法改造油菜的遺傳物質來提高油脂含量。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】轉移到被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的染色體DNA上；5′；BamHⅠ；能吸收周圍環境中DNA分子；新霉素和β-葡萄糖苷酸；白色菌落；對油菜的PEP基因進行敲除使其失效
【解答】
【點評】
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