如圖表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，如圖表示一種質粒的結構和部分堿基序列。現有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ四種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。
（1）限制性核酸內切酶切斷的化學鍵所處的具體部位是 一條鏈上相鄰兩個核苷酸的磷酸基團與脫氧核糖之間一條鏈上相鄰兩個核苷酸的磷酸基團與脫氧核糖之間。
（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割左圖所示DNA片段，其產物長度為537bp、661bp和 790790bp。
（3）若左圖中虛線方框內的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變為基因d。從雜合子中分離出下圖及其對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產物中共有 44種不同長度的DNA片段。
（4）若將右圖中質粒和目的基因D通過同一種限制酶處理后進行連接，形成重組質粒，那么應選用的限制酶是 BamHⅠBamHⅠ，理由是 MspⅠ和SmaⅠ會破壞目的基因，MboⅠ會將質粒上的兩個標記基因全破壞，BamHⅠ在目的基因兩端和質粒抗生素A抗性基因上有識別序列，既能形成重組質粒，又因破壞2個標記基因中的一個利于篩選MspⅠ和SmaⅠ會破壞目的基因，MboⅠ會將質粒上的兩個標記基因全破壞，BamHⅠ在目的基因兩端和質粒抗生素A抗性基因上有識別序列，既能形成重組質粒，又因破壞2個標記基因中的一個利于篩選。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】一條鏈上相鄰兩個核苷酸的磷酸基團與脫氧核糖之間；790；4；BamHⅠ；MspⅠ和SmaⅠ會破壞目的基因，MboⅠ會將質粒上的兩個標記基因全破壞，BamHⅠ在目的基因兩端和質粒抗生素A抗性基因上有識別序列，既能形成重組質粒，又因破壞2個標記基因中的一個利于篩選
【解答】
【點評】
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發布：2024/9/13 0:0:8組卷：4引用：1難度：0.5
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6