非洲豬瘟是非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的傳染病，致死率極高。P30蛋白是ASFV表面的結構蛋白之一。為盡早檢測出豬是否被該病毒感染，科研人員對P30蛋白單克隆抗體的制備進行研究。
（1）科研人員在ASFV的諸多蛋白中，針對P30蛋白制備單克隆抗體的理由是 P30蛋白是ASFV表面特有的蛋白質P30蛋白是ASFV表面特有的蛋白質。
（2）用P30蛋白免疫健康小鼠，取脾細胞，利用 聚乙二醇（PEG）聚乙二醇（PEG）作為促融劑，與骨髓瘤細胞融合，獲得雜交瘤細胞。
（3）將上述細胞稀釋后置于96孔培養板中培養，10天后進行抗體檢測，原理如圖1。
?①將固定有P30蛋白的載體分為多組，每組分別加入各培養孔中的 上清液上清液（細胞/上清液），孵育1h后沖洗。
②每組加入酶標抗體孵育1h,沖洗三次，沖洗的目的是 將未與待測抗體結合的酶標抗體沖洗掉將未與待測抗體結合的酶標抗體沖洗掉。
③每組加入相應酶促反應底物，選擇 顏色深顏色深的組別所對應培養孔，將其中的細胞進一步克隆化培養，獲得穩定分泌P30蛋白單克隆抗體的細胞系5E8。
（4）為進一步提高診斷效率，研究人員將P30蛋白中的6個肽段（圖2的TQ、IV、AE、FK、QK、GK）分別與細胞系5E8分泌的單抗進行反應，結果如圖3。?
①據圖分析，P30蛋白中與單抗結合特異性最強的肽段由 4646個氨基酸組成。
②基于以上研究，請提出制備ASFV單抗的優化方案 單抗制備過程中，用FK作為抗原免疫小鼠單抗制備過程中，用FK作為抗原免疫小鼠。
【考點】單克隆抗體及其應用．
【答案】P30蛋白是ASFV表面特有的蛋白質；聚乙二醇（PEG）；上清液；將未與待測抗體結合的酶標抗體沖洗掉；顏色深；46；單抗制備過程中，用FK作為抗原免疫小鼠
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/5 8:0:9組卷：23引用：1難度：0.6
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（2）對③篩選出的雜交瘤細胞，還需進行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。與傳統血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優點是（答出一點）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內需要經過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞。體外培養到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞會因為、有害代謝物的積累和培養液中營養物質缺乏等因素而分裂受阻，需進行傳代培養。
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發布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7