在轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的研究過程中，采用了圖示質(zhì)粒。其上有SalⅠ，HindⅢ和BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，獲得此質(zhì)粒的農(nóng)桿菌表現(xiàn)出對兩種抗生素的抗性。
（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用 HindⅢHindⅢ和SalⅠ兩種限制酶切割目的基因的兩端及質(zhì)粒，可防止 目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接。
（2）用分別含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選農(nóng)桿菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)含有目的基因的農(nóng)桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，這說明 抗四環(huán)素基因被破壞抗四環(huán)素基因被破壞。
（3）采用農(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞是因其體內(nèi)的重組Ti質(zhì)粒上的 T-DNAT-DNA能將目的基因插入到煙草細(xì)胞的染色體DNA上。
（4）用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草植株，依據(jù)的原理是 植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性。
（5）導(dǎo)入抗鹽基因的煙草是否可以表達(dá)其遺傳特性，需檢測 抗鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質(zhì)抗鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質(zhì)，除上述分子水平檢測外還需進(jìn)行 個(gè)體水平上抗鹽個(gè)體水平上抗鹽鑒定。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】HindⅢ；目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接；抗四環(huán)素基因被破壞；T-DNA；植物細(xì)胞的全能性；抗鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質(zhì)；個(gè)體水平上抗鹽
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/8/14 7:0:1組卷：3引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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