磷是植物生長和發育所必需的大量元素之一，在土壤缺磷條件下，OsPHR2基因可顯著提高植物對磷的吸收。為獲得能高效利用磷的轉基因小麥植株，科學家以普通小麥為受體，采用轉基因技術對OsPHR2基因和草銨膦抗性基因進行了遺傳轉化，如圖表示表達載體片段和酶切位點。
回答下列問題：
（1）制備轉化片段：首先利用 AA（A．HindⅢ酶 B．BamHⅠ酶和KpnⅠ酶 C．BamHⅠ酶和HindⅢ酶 D．SacⅠ酶和KpnⅠ酶）切環狀表達載體，獲得如圖線性轉化片段，該片段中除含有OsPHR2基因和草銨膦抗性基因外，還應含有 啟動子和終止子啟動子和終止子。
（2）轉基因小麥：將小麥種子在無菌條件下進行 消毒消毒，剝取幼胚接種于誘導培養基上，經過脫分化后形成 愈傷組織愈傷組織。通過基因槍法將轉化片段導入受體材料中，從受體材料角度考慮，影響轉化成功率的因素有 小麥的品種、基因型和生理狀態等小麥的品種、基因型和生理狀態等（寫1點即可）。
（3）培養與移栽：將轉基因小麥受體組織暗培養后，轉移至分化培養基上，利用 草銨膦草銨膦進行篩選，將獲得的叢狀苗轉移至 生根生根培養基上，獲得試管苗后經 煉苗（或鍛煉）煉苗（或鍛煉）才可移栽。
（4）轉OsPHR2基因植株的檢測：提取轉基因小麥植株葉片基因組DNA，分別對目的基因OsPHR2進行 PCRPCR，其擴增產物通過 電泳（或瓊脂糖凝膠電泳）電泳（或瓊脂糖凝膠電泳）進行分離，結果如圖2。
陽性對照組和空白對照組檢測反應體系配方的區別是，前者需加入 OsPHR2基因OsPHR2基因。實驗結果表明 4、5、74、5、7組植株目的基因已經整合到小麥基因組中。
（5）利用轉基因技術獲取磷高效吸收利用的小麥新品種，它的環保價值有 減少土壤富營養化減少土壤富營養化（寫1點即可）。
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養．
【答案】A；啟動子和終止子；消毒；愈傷組織；小麥的品種、基因型和生理狀態等；草銨膦；生根；煉苗（或鍛煉）；PCR；電泳（或瓊脂糖凝膠電泳）；OsPHR2基因；4、5、7；減少土壤富營養化
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/16 8:0:9組卷：5引用：2難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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