腫瘤壞死因子（TNF）在體內、體外均能殺死某些腫瘤細胞或抑制腫瘤細胞的增殖作用。科研人員利用乳腺生物反應器大量生產腫瘤壞死因子。已知限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ的識別序列及切點分別是G↓GATCC、A↓AGCTT、CTGC↓AG、A↓GATCT。回答下列問題：
（1）在構建基因表達載體時，能否選用PstI切割質粒和含腫瘤壞死因子基因的DNA片段，其原因是 不能，因為用PstⅠ切割質粒會破壞四環素抗性基因不能，因為用PstⅠ切割質粒會破壞四環素抗性基因；若用HindⅢ和BglⅡ切割含腫瘤壞死因子基因的DNA片段，除選用HindⅢ和BglⅡ組合外還可以選用 HindⅢ、BamHⅠHindⅢ、BamHⅠ組合切割質粒。
（2）利用PCR技術擴增TNF基因時，擴增過程可以在 PCR儀PCR儀中自動完成。已知DNA復制時，只能從子鏈的5′端向3′端開始延伸，據此可知應選擇圖3甲、乙、丙、丁四種引物中的 乙、丙乙、丙作為引物，若擴增4次，共需要引物 3030個。
（3）科學家需將TNF基因與 乳腺細胞中特異表達的基因的啟動子等調控元件乳腺細胞中特異表達的基因的啟動子等調控元件重組在一起，通過 顯微注射顯微注射等方法，導入哺乳動物的 受精卵受精卵中，由其發育成的轉基因動物進入泌乳期后，可以在其分泌的乳汁中獲取所需要的TNF。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】不能，因為用PstⅠ切割質粒會破壞四環素抗性基因；HindⅢ、BamHⅠ；PCR儀；乙、丙；30；乳腺細胞中特異表達的基因的啟動子等調控元件；顯微注射；受精卵
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：15引用：4難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6