除草劑的有效成分草甘膦能夠專一性地抑制EPSP合酶的活性，從而使植物體內多種代謝途徑受到影響而導致植物死亡，并且這種作用沒有選擇性，在除去雜草的同時也會影響農作物的生長。科學家將能夠降解草甘膦的基因導入大豆體內，培育出了抗除草劑的轉基因大豆。請回答下列問題：
（1）將抗除草劑基因轉入大豆體內時常用的“分子工具”有限制性內切核酸酶、DNA連接酶DNA連接酶和載體三種，在構建基因表達載體時往往需要用同一種限制酶切割目的基因和載體，其原因是 使目的基因和載體產生相同的黏性末端，利于目的基因與載體連接使目的基因和載體產生相同的黏性末端，利于目的基因與載體連接。
（2）獲取目的基因后需要利用PCR擴增技術獲得大量的目的基因，在PCR反應的緩沖液中往往需要加入耐高溫的DNA聚合酶，其理由是 PCR利用高溫使DNA雙鏈解開PCR利用高溫使DNA雙鏈解開。
（3）基因表達載體除了含有目的基因、啟動子和終止子外還必須有 標記基因、復制原點標記基因、復制原點（至少答出兩點），將目的基因導入受體細胞常用的方法有 農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法（答出一種即可）。
（4）目的基因導入受體細胞后，是否穩定維持和表達其遺傳特性，需要檢測和鑒定，請從個體水平上提出鑒定抗除草劑大豆是否培育成功的措施 思路：用草甘膦同時噴灑轉基因大豆，觀察其存活情況 預測結果：轉基因大豆存活 結論：降解草甘膦的基因在大豆細胞中穩定維持和成功表達思路：用草甘膦同時噴灑轉基因大豆，觀察其存活情況 預測結果：轉基因大豆存活 結論：降解草甘膦的基因在大豆細胞中穩定維持和成功表達（寫出簡單的思路并預測結果及結論）。
（5）將抗除草劑基因導入大豆后培育的轉基因大豆往往會引起基因污染，若將玉米體內的一種α-淀粉酶與抗除草劑基因一起轉入大豆中可以避免基因污染，其原因是 玉米體內的α-淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏使花粉失去活性玉米體內的α-淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏使花粉失去活性。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA連接酶；使目的基因和載體產生相同的黏性末端，利于目的基因與載體連接；PCR利用高溫使DNA雙鏈解開；標記基因、復制原點；農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法；思路：用草甘膦同時噴灑轉基因大豆，觀察其存活情況 預測結果：轉基因大豆存活 結論：降解草甘膦的基因在大豆細胞中穩定維持和成功表達；玉米體內的α-淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏使花粉失去活性
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/19 8:0:9組卷：4引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6