結核病是由結核分枝桿菌（簡稱結核菌）引起的致死性疾病，接種卡介苗是預 防結核病的有效手段。近年來，耐藥結核病不斷出現(xiàn)。我國科研工作者研制出了一種重組耐 藥卡介苗（RdrBCG），即在原有卡介苗的基礎上引入Ag85B和Rv2628處兩個新的基因，用于輔助治療耐藥結核病。
（1）在重組質(zhì)粒建構過程中，使用到了限制酶Pstn結合圖示所給酶切位點（灰色底色） 等信息，設計重組質(zhì)粒的制備過程：先將 Rv2628Rv2628與質(zhì)粒混合，加入限制酶 PstⅠ和NdeⅠPstⅠ和NdeⅠ，再加入DNA連接酶形成重組質(zhì)粒Ⅰ，再將重組質(zhì)粒Ⅰ與 Ag85BAg85B混合，加入限制酶 BamHⅠ和HlindⅢBamHⅠ和HlindⅢ，再加入DNA連接酶形成重組質(zhì)粒。
（2）將野生結核菌接種在含有多種治療結核病藥物的培養(yǎng)基中，最終篩選出了一種耐藥菌株作為實驗材料。下列對于該耐藥菌獲得的過程說明正確的是 BCBC。（多選）
A.培養(yǎng)基中的藥物使結核菌產(chǎn)生耐藥性變異
B.培養(yǎng)過程中結核菌的變異結果多樣
C.耐藥結核菌在培養(yǎng)基環(huán)境的選擇作用下存活
D.培養(yǎng)基中的藥物加劇了結核菌的突變速率
（3）對免疫缺陷小鼠接種RdrBCG，下列實驗結果能說明RdrBCG安全性的是 CC。
A.肺部檢測到Ag85B、Rv2628穩(wěn)定表達
B.肺部提取物經(jīng)培養(yǎng)可見結核菌菌落
C.小鼠未患結核病且存活
D.脾部提取物經(jīng)培養(yǎng)可見結核菌菌落
（4）為檢測RdrBCG是否具有輔助治療耐藥結核病的效果，用耐藥結核菌感染的小鼠作為實驗對象，應選擇下列 ③⑤⑥③⑤⑥。（填寫編號）
①接種RdrBCG的小鼠
②接種普通卡介苗的小鼠
③藥物治療+接種RdrBCG
④藥物治療+接種普通卡介苗
⑤不作處理的被感染小鼠
⑥藥物治療被感染的小鼠
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Rv2628；PstⅠ和NdeⅠ；Ag85B；BamHⅠ和HlindⅢ；BC；C；③⑤⑥
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：2難度：0.6
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（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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