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          利用乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)人白細(xì)胞介素2(hIL-2)和與其具有協(xié)同作用的融合蛋白(由兩個(gè)單獨(dú)基因編碼的結(jié)構(gòu)域組成的蛋白質(zhì))藥物,但融合蛋白常難以發(fā)揮各組分的正常功能。研究發(fā)現(xiàn),口蹄疫病毒2A肽(FMDV 2A)是一種“自切割”多肽,能將自身切成4個(gè)片段,可用于構(gòu)建多基因表達(dá)載體。如圖是構(gòu)建FMDV 2A介導(dǎo)的hIL-2基因和增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)基因乳腺特異性表達(dá)載體,并驗(yàn)證其在乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)的主要過(guò)程,以期為提高乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的效能奠定基礎(chǔ)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

          (1)過(guò)程①應(yīng)選用的引物是
          引物2和引物3
          引物2和引物3
          ,該過(guò)程除加入引物外,還需加入
          耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等
          耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等

          (2)下面4種引物可用于過(guò)程①的是
          P1和P2
          P1和P2

          P1:5'-CCCTCGAGATGTACAGGATCCTGTACAT-3'
          P2:5'-CCATCGATTCAAGTTAGTGTTGAGATGA-3'
          P3:5'-CCCTCGAGATGTACAGGATGCAACTCCT-3'
          P4:5'-CCGAGCTCAGTGTTGAGATGAATCGATC-3'
          (3)過(guò)程③中,使用人工膜制成的脂質(zhì)體將質(zhì)粒3導(dǎo)入受體細(xì)胞,其主要原理是
          生物膜具有一定的流動(dòng)性
          生物膜具有一定的流動(dòng)性

          (4)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞置于含
          新霉素
          新霉素
          的培養(yǎng)液中培養(yǎng)、篩選;將篩選出的細(xì)胞置于含催乳素的培養(yǎng)液中培養(yǎng),利用熒光顯微鏡觀察
          是否有綠色熒光
          是否有綠色熒光
          ,進(jìn)一步篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞,培養(yǎng)液中加入催乳素的作用是
          誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達(dá)
          誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達(dá)

          (5)過(guò)程④中,乳腺上皮細(xì)胞中檢測(cè)到游離的hIL-2,原因是
          目的基因未成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA上
          目的基因未成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA上
          。與生產(chǎn)融合蛋白藥物相比,此項(xiàng)研究有望提高乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的效能,主要表現(xiàn)是
          實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)基因的合并表達(dá),能夠使兩者同時(shí)起作用
          實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)基因的合并表達(dá),能夠使兩者同時(shí)起作用

          (6)研究人員試圖以轉(zhuǎn)染成功的奶牛乳腺上皮細(xì)胞作為供體,培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因克隆胚胎,主要涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有
          )動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)
          )動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)

          【答案】引物2和引物3;耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等;P1和P2;生物膜具有一定的流動(dòng)性;新霉素;是否有綠色熒光;誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達(dá);目的基因未成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA上;實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)基因的合并表達(dá),能夠使兩者同時(shí)起作用;)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)
          【解答】
          【點(diǎn)評(píng)】
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          發(fā)布:2024/6/4 8:0:5組卷:9引用:1難度:0.4
          相似題
          • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

            發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
          • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是(  )

            發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
          • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題:
            (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
             
             

            (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
             
            。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
             
            。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
             

            (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見的有
             
             
            ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
             
            。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
             

            (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
             

            (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
             

            發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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