利用乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)人白細(xì)胞介素2(hIL-2)和與其具有協(xié)同作用的融合蛋白(由兩個(gè)單獨(dú)基因編碼的結(jié)構(gòu)域組成的蛋白質(zhì))藥物,但融合蛋白常難以發(fā)揮各組分的正常功能。研究發(fā)現(xiàn),口蹄疫病毒2A肽(FMDV 2A)是一種“自切割”多肽,能將自身切成4個(gè)片段,可用于構(gòu)建多基因表達(dá)載體。如圖是構(gòu)建FMDV 2A介導(dǎo)的hIL-2基因和增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)基因乳腺特異性表達(dá)載體,并驗(yàn)證其在乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)的主要過(guò)程,以期為提高乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的效能奠定基礎(chǔ)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

(1)過(guò)程①應(yīng)選用的引物是 引物2和引物3引物2和引物3,該過(guò)程除加入引物外,還需加入 耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等。
(2)下面4種引物可用于過(guò)程①的是 P1和P2P1和P2。
P1:5'-CCCTCGAGATGTACAGGATCCTGTACAT-3'
P2:5'-CCATCGATTCAAGTTAGTGTTGAGATGA-3'
P3:5'-CCCTCGAGATGTACAGGATGCAACTCCT-3'
P4:5'-CCGAGCTCAGTGTTGAGATGAATCGATC-3'
(3)過(guò)程③中,使用人工膜制成的脂質(zhì)體將質(zhì)粒3導(dǎo)入受體細(xì)胞,其主要原理是 生物膜具有一定的流動(dòng)性生物膜具有一定的流動(dòng)性。
(4)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞置于含 新霉素新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)、篩選;將篩選出的細(xì)胞置于含催乳素的培養(yǎng)液中培養(yǎng),利用熒光顯微鏡觀察 是否有綠色熒光是否有綠色熒光,進(jìn)一步篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞,培養(yǎng)液中加入催乳素的作用是 誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達(dá)誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達(dá)。
(5)過(guò)程④中,乳腺上皮細(xì)胞中檢測(cè)到游離的hIL-2,原因是 目的基因未成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA上目的基因未成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA上。與生產(chǎn)融合蛋白藥物相比,此項(xiàng)研究有望提高乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的效能,主要表現(xiàn)是 實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)基因的合并表達(dá),能夠使兩者同時(shí)起作用實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)基因的合并表達(dá),能夠使兩者同時(shí)起作用。
(6)研究人員試圖以轉(zhuǎn)染成功的奶牛乳腺上皮細(xì)胞作為供體,培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因克隆胚胎,主要涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有 )動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù))動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】引物2和引物3;耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等;P1和P2;生物膜具有一定的流動(dòng)性;新霉素;是否有綠色熒光;誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達(dá);目的基因未成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA上;實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)基因的合并表達(dá),能夠使兩者同時(shí)起作用;)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/4 8:0:5組卷:9引用:1難度:0.4
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( )
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細(xì)胞中檢測(cè)到相應(yīng)的目的基因,則說(shuō)明基因工程項(xiàng)目獲得成功 C.蛋白質(zhì)工程需構(gòu)建基因表達(dá)載體,改造后的蛋白質(zhì)的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過(guò)花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( )
A.質(zhì)粒上標(biāo)記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細(xì)胞的DNA中才能復(fù)制 C.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7 -
3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見的有
(4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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