二十碳五烯酸（EPA）能促進體內飽和脂肪酸代謝，是人體自身不能直接合成但又不可缺少的營養物質。獲取EPA產品的主要途徑是從魚油等海洋漁業資源中提取。研究人員利用轉基因技術從海洋細菌中提取了EPA合成途徑的關鍵基因pfaB，并將其導入酵母菌內，通過酵母菌發酵生產EPA，相關過程如圖所示，請回答下列問題：
（1）PCR是 聚合酶鏈式反應聚合酶鏈式反應的縮寫，是在體外大量合成DNA的技術。PCR過程中，用 90°C以上高溫90°C以上高溫代替了解旋酶的作用。
（2）利用PCR擴增pfaB基因前，需設計引物 ①④①④（填序號），理由是 DNA聚合酶只能從引物的3'端延伸DNA鏈DNA聚合酶只能從引物的3'端延伸DNA鏈。
（3）將pfaB基因連接在pP1C9質粒上時所用的酶是 DNA連接酶DNA連接酶。
（4）將pfaB-pP1C9表達載體導入酵母菌前，需先將表達載體導入大腸桿菌并進行篩選，篩選時培養基中應加入 氨芐青霉素氨芐青霉素，再將含有表達載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉杯中，通過電激將大腸桿菌導入酵母菌，使該表達載體進入酵母菌細胞中.
（5）pfaB-pP1C9表達載體在酵母菌中不會隨著其繁殖而丟失的原因是表達載體上含有 真核真核（填“真核”或“原核”）生物復制原點，能在酵母菌中復制。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；基因工程的操作過程綜合．
【答案】聚合酶鏈式反應；90°C以上高溫；①④；DNA聚合酶只能從引物的3'端延伸DNA鏈；DNA連接酶；氨芐青霉素；真核
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/9 8:0:9組卷：4引用：1難度：0.6
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1．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7