纖毛是廣泛存在的細胞表面結構，功能異常可引起多種疾病。因此，研究纖毛形成的作用機制具有重要意義。請回答下列問題。
（1）纖毛結構如圖1所示，由細胞膜延伸形成的纖毛膜主要由中心體轉變而來，中心體在有絲分裂中的功能是 參與紡錘體的形成，是紡錘體形成中心參與紡錘體的形成，是紡錘體形成中心。
（2）某病人腎小管上皮細胞纖毛異常，為了分析纖毛相關基因X是否發生了變異，對基因X進行了PCR擴增與產物測序。從細胞樣品中分離DNA時，可通過交替調節鹽濃度將與核蛋白結合的DNA分離出來，溶液中添加NaCl至2.0mo1/L的目的是 溶解DNA溶解DNA。PCR擴增時，需在 耐高溫DNA聚合酶耐高溫DNA聚合酶催化下，在引物 3'3'端進行DNA鏈的延伸，獲得擴增產物用于測序。
（3）為研究蛋白質X在細胞中的定位，構建綠色熒光蛋白GFP與X的融合蛋白，融合蛋白具有綠色熒光，可示其在細胞內位置。將X-GFP基因融合片段M導入如圖Ⅱ所示載體質粒Y，構建Y-M重組質粒（在EcoRV位點插入片段）。請完成如表。
| 分步實驗目標 | 簡易操作、結果、分析 |
| PCR鑒定正向重組質粒Y-M（圖Ⅱ中融合片段M中有白色的箭頭，代表方向） | ①選擇圖Ⅱ引物 a、b a、b ；②PCR目的產物約為 1100 1100 bp。 |
| 確保M及連接處序列正確，Y-M的連接處上游含有HindⅢ+ECoRⅤ的識別序列，下游含有EcoRⅤ+BamHⅠ的識別序列 | ③質粒測序，圖Ⅲ中正確的是 Q4 Q4 （選填序列編號） |
| 檢測融合蛋白定位 | ④對照質粒Y-GFP（僅表達GFP）與實驗質粒Y-M分別導入細胞，發現對照組整個細胞均有綠色熒光，而實驗組熒光集中在纖毛基部，說明X蛋白參與 中心體 中心體 的形成。 |
逆轉錄
逆轉錄
形成cDNA作為模板，PCR擴增結果顯示，在總cDNA模板量相等的條件下，健康人Ct值為15，而病人Ct值為20（Ct值是產物熒光強度達到設定閾值時的PCR循環數）。【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；各類細胞器的結構和功能．
【答案】參與紡錘體的形成，是紡錘體形成中心；溶解DNA；耐高溫DNA聚合酶；3'；a、b；1100；Q4；中心體；逆轉錄
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/24 14:0:35組卷：27引用：1難度：0.5
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1．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：4引用：3難度：0.7
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