某一質粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導致相應的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環素抗性基因)。有人將此質粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連續反應,用得到的混合物直接轉化大腸桿菌。結果大腸桿菌有的未被轉化,有的被轉化。被轉化的大腸桿菌有三種,分別是含有環狀目的基因,含有質粒載體,含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌。回答下列問題:
(1)質粒載體作為基因工程的工具,應具備的基本條件有 能自我復制、具有標記基因能自我復制、具有標記基因(答出兩點即可)。而作為基因表達載體,除滿足上述基本條件外,還需具有 啟動子啟動子和 終止子終止子。
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細胞中,未被轉化的和僅含有環狀目的基因的細胞是不能區分的,其原因是 二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養基上均不生長二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養基上均不生長;并且載體和重組質粒的細胞也是不能區分的,其原因是 二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養基上均能生長二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養基上均能生長。在上述篩選的基礎上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌單菌落,還需使用含有 四環素四環素的固體培養基。
【考點】基因進入受體細胞的載體;基因表達載體的構建.
【答案】能自我復制、具有標記基因;啟動子;終止子;二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養基上均不生長;二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養基上均能生長;四環素
【解答】
【點評】
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發布:2024/4/20 14:35:0組卷:68引用:1難度:0.7
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