鐮孢菌引起的小麥赤霉病被稱為小麥“游癥”，是威脅糧食安全的重大國際性難題。我國科學家從小麥近緣屬植物長穗偃麥草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（編碼一種谷胱甘肽S-轉移酶），為解決小麥赤霉病的世界性難題提供了“金鑰匙”。研究發現，用光誘導型啟動子（PrbcS）能夠使Fhb7基因表達，其結合T基因后能使Fhb7基因更高水平表達。
（1）PrbcS是一段有特殊結構的DNA片段，能被 RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結合，驅動基因的持續 轉錄轉錄。
（2）通過PCR技術擴增Fhb7基因片段，反應過程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對、72℃延伸三個步驟，經過多次循環完成。延伸階段選用72℃綜合考慮了兩個因素，這兩個因素是 防止DNA變性防止DNA變性和 保持Taq酶活性所需溫度條件保持Taq酶活性所需溫度條件，若研究人員在反應緩沖溶液中加入4種dNTP時，誤加入了單一種類的ddNTP（即2、3雙脫氧核苷三磷酸，在脫氧核糖的3位置缺少一個羧基），則子鏈會停止延伸，分析其原因是 3號碳上不是羥基，不能與下一個脫氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯鍵3號碳上不是羥基，不能與下一個脫氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯鍵。
（3）如圖中甲、乙均為Fhb7基因表達載體構建過程中的中間載體，請分析重組載體的部分構建過程。
（注：Kmr為卡那霉素抗性基因，origin為復制原點，其余為限制酶酶切位點）
區別含有中間載體甲-PrbcS-*T與含有重組載體乙-PrbcS-*T的微生物的方法是 用含有卡那霉素的培養基培養用含有卡那霉素的培養基培養。經酶切后凝膠電泳，測得2B片段為0.3kb,經圖示信息分析，PrbcS-T的長度約為 1.8kb1.8kb。據圖分析，形成重組載體乙-PrbcS-*T，需要使用限制酶 EcoRⅠEcoRⅠ切割，圖中重組載體乙-PrbcS-*T問號處有 EcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤEcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤ種限制酶的酶切位點。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】RNA聚合酶；轉錄；防止DNA變性；保持Taq酶活性所需溫度條件；3號碳上不是羥基，不能與下一個脫氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯鍵；用含有卡那霉素的培養基培養；1.8kb；EcoRⅠ；EcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤ
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：2難度：0.5
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1．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7