草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時也殺死農作物。它與植物體內的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結構相似，可與PEP競爭結合EPSP合酶，阻止PEP轉化，影響植物細胞正常代謝而導致植物死亡。我國科學家從草甘膦施用土壤中的微生物體內獲取草甘膦抗性基因GR29，并將其導入大豆體細胞中獲得轉基因抗草甘膦大豆，如圖所示。回答下列問題：
（1）圖中的GR29基因稱為 目的基因目的基因，通過PCR技術可在總DNA中專一性的擴增出GR29基因，原因是 PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結合PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結合。
（2）圖中將GR29基因插入到Ti質粒的T-DNA上，原因是農桿菌能將Ti質粒上的T-DNA分子轉移到宿主細胞并整合到宿主細胞的 染色體DNA染色體DNA上。構建的重組Ti質粒中除圖示元件外，還必須具有啟動子和終止子，其中啟動子的作用是 啟動子是RNA聚合酶識別與結合的部位，它能驅動目的基因轉錄出mRNA啟動子是RNA聚合酶識別與結合的部位，它能驅動目的基因轉錄出mRNA。
（3）圖中的兩次篩選中，其中“篩選1”中，需在農桿菌的培養基中添加 四環素四環素，才能篩選出含重組Ti質粒的農桿菌。在“篩選2”中，為檢測GR29基因能否翻譯出相應蛋白可采用的方法是 抗原—抗體雜交技術抗原—抗體雜交技術。
（4）為獲得草甘膦抗性更強的轉基因大豆，請嘗試對上述轉基因大豆培育過程進行改進，寫出你的改進措施：用添加草甘膦的培養基進行篩選，并可逐步增加濃度用添加草甘膦的培養基進行篩選，并可逐步增加濃度。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因；PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結合；染色體DNA；啟動子是RNA聚合酶識別與結合的部位，它能驅動目的基因轉錄出mRNA；四環素；抗原—抗體雜交技術；用添加草甘膦的培養基進行篩選，并可逐步增加濃度
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：1難度：0.7
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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