腦心肌炎病毒（EMCV，RNA病毒）是引起人、豬腦炎和心肌炎的病原體。為研制疫苗，科研人員按如圖流程培育轉基因酵母菌，來生產EMCV的衣殼蛋白VP1。其中，受體酵母菌是組氨酸合成缺陷型，HIS4基因表達的酶催化組氨酸的合成，C418是一種抗生素。請回答下列問題：
（1）過程①通過RT-PCR獲得目的基因，需要的工具酶有 逆轉錄酶逆轉錄酶、熱穩定性DNA聚合酶熱穩定性DNA聚合酶。
（2）下列3種引物中，過程①應選擇的是 acac。
a.5'-GGAATTCGCCACCATCCGAGTCGAAAACGCTGAA-3'
b.5'-TCGTCGACCATCGATAGCCACTCGCCTAACGCC-3'
c.5'-ATTTGCGCCGCTCACTCTAGCATCAAGACT-3'
（3）過程③將質粒2導入大腸桿菌的目的是 讓其在大腸桿菌中復制讓其在大腸桿菌中復制，該過程需要用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌，使其成為感受態細胞。
（4）過程⑤將質粒2線性化時使用的是 salⅠsalⅠ （限制酶），過程⑥線性DNA需整合到酵母細胞的染色體DNA中目的基因才能 穩定遺傳并表達穩定遺傳并表達。
（5）線性DNA整合到酵母細胞染色體DNA時，可能是單拷貝整合，也可能是多拷貝整合。過程⑦先將酵母菌培養在缺乏 組氨酸組氨酸的培養基中，篩選獲得導入目的基因的酵母菌；后將篩選出的酵母菌接種于含2mg?L-1G418的培養基中進行培養，選擇生長良好的酵母菌再轉接到含4mg?L-1G418的培養基中繼續培養，其目的是 篩選出目的基因多拷貝整合的酵母菌篩選出目的基因多拷貝整合的酵母菌。
（6）研究人員用兔抗EMCV血清與酵母細胞生產的VP1蛋白進行抗原-抗體免疫反應試驗，其目的是 檢測酵母細胞生產的VP1與EMCV的VP1的抗原性（結構）是否一致檢測酵母細胞生產的VP1與EMCV的VP1的抗原性（結構）是否一致。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄酶；熱穩定性DNA聚合酶；ac；讓其在大腸桿菌中復制；Ca2+；salⅠ；穩定遺傳并表達；組氨酸；篩選出目的基因多拷貝整合的酵母菌；檢測酵母細胞生產的VP1與EMCV的VP1的抗原性（結構）是否一致
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：12引用：1難度：0.7
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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