乙型肝炎病毒（HBV）可引發慢性肝炎、肝硬化等疾病，乙型肝炎病毒調節蛋白HBx對HBV復制有重要作用。圖1表示在PCR過程中HBx基因與引物的關系，圖2表示利用中國倉鼠生產乙肝病毒HBx蛋白流程圖。回答下列問題：
（1）利用PCR技術擴增圖1中HBx基因時，在第33次循環結束后即可出現兩條鏈等長的目的基因片段。圖2中②過程需要用到限制酶和DNA連接酶，兩種酶作用的化學鍵相同相同（填“相同”或“不相同”）。
（2）基因表達載體導入受精卵常用顯微注射顯微注射法，檢測HBx基因是否轉錄出mRNA時，需要用放射性同位素標記的含目的基因的DNA片段放射性同位素標記的含目的基因的DNA片段做探針，再與相應的物質雜交。
（3）④過程體外受精前需要對精子進行獲能獲能處理，卵母細胞需要發育到MⅡ中MⅡ中期，才具備與精子受精的能力。⑤過程將獲得的早期胚胎移植到經過同期發情同期發情處理的受體倉鼠子宮內。
（4）在⑤步驟操作前對胚胎進行了檢查和篩選，發現有些胚胎因為外源基因的插入而死亡外源基因插入導致胚胎死亡的原因可能是外源基因的插入導致胚胎正常發育所需的基因不能表達外源基因的插入導致胚胎正常發育所需的基因不能表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】3；相同；顯微注射；放射性同位素標記的含目的基因的DNA片段；獲能；MⅡ中；同期發情；外源基因的插入導致胚胎正常發育所需的基因不能表達
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：3難度：0.6
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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