大芻草是玉米的原始祖先，具有較強的抗病抗逆等特性，可為玉米育種提供原始的遺傳材料。研究發現，大芻草基因組中有一個D基因僅在體細胞（2n）和精子中正常表達，在卵細胞中不轉錄。為研究D基因表達對卵細胞的影響，某小組設計了以下實驗。據圖回答下列問題：
（1）大芻草D基因與Luc基因融合前需要利用 同一種限制酶同一種限制酶切割。融合后的少量D-Luc基因可以利用 PCR技術PCR技術獲取大量的D-Luc融合基因。
（2）要構建大芻草的DNA文庫，應從大芻草 體細胞體細胞（填“卵細胞”“精子”“體細胞”或“體細胞或精子”）中提取總RNA，原因是 大芻草體細胞中有大芻草全部的DNA且D基因在體細胞中正常表達，而精子中一半的核DNA，卵細胞中D基因不能正常表達（不轉錄）大芻草體細胞中有大芻草全部的DNA且D基因在體細胞中正常表達，而精子中一半的核DNA，卵細胞中D基因不能正常表達（不轉錄）。
（3）在過程①前，一般需要用 Ca2+Ca2+處理農桿菌細胞，使其具備 吸收周圍環境中DNA分子吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態。過程②轉化篩選。
（4）從轉入D-Luc融合基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細胞內僅含一個染色體組，判定該胚是由未受精的卵細胞發育形成的，而一般情況下，大芻草卵細胞在未受精時不進行發育，由此表明 D-Luc融合基因能在卵細胞中表達且使卵細胞不經受精而直接發育成胚D-Luc融合基因能在卵細胞中表達且使卵細胞不經受精而直接發育成胚。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】同一種限制酶；PCR技術；體細胞；大芻草體細胞中有大芻草全部的DNA且D基因在體細胞中正常表達，而精子中一半的核DNA，卵細胞中D基因不能正常表達（不轉錄）；Ca2+；吸收周圍環境中DNA分子；D-Luc融合基因能在卵細胞中表達且使卵細胞不經受精而直接發育成胚
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：3引用：4難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6