某種熒光蛋白（GFP）在紫外線或藍光激發下會發出綠色熒光，這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡稱甲），并將其插入質粒PO，構建了真核表達載體P1，其部分結構和酶切點的示意圖如下，圖中E1～E4四種限制酶產生的黏性末端各不相同。
回答下列問題：
（1）據圖推斷，該團隊在將甲插入質粒PO時，使用了兩種限制酶，這兩種酶是E1、E4E1、E4。使用這兩種酶進行酶切是為了保證甲的完整甲的完整，也是為了保證甲與載體正確連接甲與載體正確連接。
（2）將P1轉入體外培養的牛皮膚細胞后，若在該細胞中觀察到了綠色的熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了轉錄轉錄和翻譯翻譯過程。
（3）為了獲得含有甲的牛，該團隊需要做的工作包括：將能夠產生綠色熒光細胞的細胞核細胞核移入牛的去核卵母細胞去核卵母細胞中，體外培養，胚胎移植等。
（4）為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中，某同學用PCR方法進行鑒定。在鑒定時應分別以該牛不同組織細胞中的核DNA核DNA（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為PCR模板。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】E1、E4；甲的完整；甲與載體正確連接；轉錄；翻譯；細胞核；去核卵母細胞；核DNA
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：924引用：16難度：0.3
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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