基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術手段。研究發現普通矮牽牛花因缺乏藍色色素合成所需的轉座酶而不能開藍色花，因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細胞中分離提取的轉座酶F35H基因轉入普通的矮牽牛中，以期獲得藍色矮牽牛新品種，該過程所用的質粒與含轉座酶F35H基因的DNA片段上相關限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示。限制性內切核酸酶BamHⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC、↓GATC、A↓AGCTT。
請回答下列問題：
（1）質粒是獨立于 真核細胞的細胞核或原核細胞擬核真核細胞的細胞核或原核細胞擬核之外，具有自我復制能力的環狀雙鏈DNA分子，圖1質粒中沒有顯示的結構是 復制原點復制原點，啟動子的功能是 啟動轉錄，是RNA聚合酶結合的部位啟動轉錄，是RNA聚合酶結合的部位。
（2）若用只用HindⅢ切割含目的基因的DNA片段，有可能會帶來的不良影響是 自身環化，不利于與質粒連接；目的基因與質粒反向連接自身環化，不利于與質粒連接；目的基因與質粒反向連接。在用圖中質粒和轉座酶F35H基因構建基因表達載體時，最好選用 HindⅢ和Sau3AⅠHindⅢ和Sau3AⅠ限制酶來切割質粒和含目的基因的DNA片段，理由是 質粒和目的基因都有這兩種限制酶識別位點，并且切割后產生的黏性末端不同，不會出現自身環化現象，有利于質粒和目的基因結合質粒和目的基因都有這兩種限制酶識別位點，并且切割后產生的黏性末端不同，不會出現自身環化現象，有利于質粒和目的基因結合。
（3）將構建好的重組質粒轉入土壤農桿菌，最終成功導入藍色素基因的農桿菌，在含氨芐青霉素培養基、含四環素培養基、同時含氨芐青霉素和四環素的培養基上的生存狀況應該是 能在含氨芐青霉素的培養基上生存，但是不能在含四環素培養基和同時含兩種抗生素的培養基上生存能在含氨芐青霉素的培養基上生存，但是不能在含四環素培養基和同時含兩種抗生素的培養基上生存。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】真核細胞的細胞核或原核細胞擬核；復制原點；啟動轉錄，是RNA聚合酶結合的部位；自身環化，不利于與質粒連接；目的基因與質粒反向連接；HindⅢ和Sau3AⅠ；質粒和目的基因都有這兩種限制酶識別位點，并且切割后產生的黏性末端不同，不會出現自身環化現象，有利于質粒和目的基因結合；能在含氨芐青霉素的培養基上生存，但是不能在含四環素培養基和同時含兩種抗生素的培養基上生存
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：1難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6