實(shí)驗(yàn)小組將啟動(dòng)子rd29A和擬南芥植株的抗寒基因DREBI相連后導(dǎo)入大豆，獲得了抗寒轉(zhuǎn)基因植株，圖1表示構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)所用的載體，已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ為四種不同的限制酶，其各自識(shí)別的DNA序列如表所示。回答下列問題：
| 限制酶 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
| 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) | ↓GGATCC CCTAGG↑ |
↓TGTACA ACATGT↑ |
↓GTAC CATG↑ |
↓AAGCTT TTCGAA↑ |
Ⅱ、Ⅳ
Ⅱ、Ⅳ
兩種限制酶切割質(zhì)粒，原因是 同時(shí)使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標(biāo)記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同
同時(shí)使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標(biāo)記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同
。（2）欲將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大豆的愈傷組織細(xì)胞中，一般使用
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
法導(dǎo)入。培養(yǎng)基中需要加入 四環(huán)素
四環(huán)素
（填“四環(huán)素”或“氨芐青霉素”），其作用是 對(duì)含目的基因的組織細(xì)胞進(jìn)行篩選
對(duì)含目的基因的組織細(xì)胞進(jìn)行篩選
。（3）實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)一步研究了不同的溫度誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)基因植株中抗寒基因DREBI的表達(dá)情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，從分子水平上檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆中DREBI基因的表達(dá)產(chǎn)物，可采用的方法是
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
。試根據(jù)檢測(cè)結(jié)果闡述目的植株導(dǎo)入DREBI基因的優(yōu)點(diǎn)在于 隨著溫度的降低，DREBI基因的表達(dá)產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達(dá)，避免了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費(fèi)
隨著溫度的降低，DREBI基因的表達(dá)產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達(dá)，避免了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費(fèi)
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Ⅱ、Ⅳ；同時(shí)使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標(biāo)記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化；四環(huán)素；對(duì)含目的基因的組織細(xì)胞進(jìn)行篩選；抗原-抗體雜交；隨著溫度的降低，DREBI基因的表達(dá)產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達(dá)，避免了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費(fèi)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/8/23 6:0:3組卷：15引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6