養殖家禽的飼料中富含谷物，纖維素是谷物的重要成分，但家禽消化道中缺少能降解纖維素的酶，阻礙了家禽對飼料的吸收與利用。研究人員利用轉基因技術改造乳酸桿菌，將其添加于飼料中，以提高家禽養殖效率。
（1）枯草芽孢桿菌分泌可降解纖維素的一種酶，這種酶由W基因編碼。為在乳酸桿菌中表達W基因，需使用圖1中質粒為載體。圖2為克隆得到的含W基因的DNA片段，W基因以乙鏈為轉錄模板鏈，轉錄時mRNA自身延伸的方向為5'→3'。
①很多啟動子具有物種特異性，在圖1質粒中插入W基因，其上游啟動子應選擇 BB（填正確選項前字母）。
A.枯草芽孢桿菌啟動子
B.乳酸桿菌啟動子
C.農桿菌啟動子
②下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1.圖2中標注了相關限制酶的酶切位點。
| 限制酶 | EcoRI | BamH I | KpnI | Mfe I | HindIII |
| 識別序列及切割位點 |
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MfeⅠ、HindⅢ
MfeⅠ、HindⅢ
切割圖1中質粒，使用限制酶 EcoRⅠ、HindⅢ
EcoRⅠ、HindⅢ
切割圖2中含W基因的DNA片段，以獲得能正確表達W基因的重組質粒。所得重組質粒轉化乳酸桿菌后，使用含抗生素 氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養基篩選，以得到轉入W基因的乳酸桿菌。（2）為確定導入重組質粒的乳酸桿菌是否具有分解纖維素的能力，研究人員用液體培養基分別培養如表所示菌種。所得部分菌液接種于固體鑒定培養基上，另取部分菌液上清液測定酶活力，實驗方案及測定結果如表所示。
| 菌種 | 酶活性相對值 |
| 乳酸桿菌 | 未檢出 |
| X | 未檢出 |
| 導入了重組質粒的乳酸桿菌 | 0.96 |
導入空質粒（或“空載體”）的乳酸桿菌
導入空質粒（或“空載體”）的乳酸桿菌
。若要檢測導入重組質粒的乳酸桿菌是否合成了纖維素酶的方法是 抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
。（3）解決谷物中纖維素難以被消化吸收的另一思路是將W基因轉入家禽中，使轉基因家禽消化道特異表達能夠降解纖維素的酶。采用顯微注射的方法將重組質粒導入
（家禽）受精卵
（家禽）受精卵
細胞中，上述研究方法與該思路相比，有哪些優點 家禽轉基因難度大，成本高，且通過家禽轉基因只能改造一種家禽，本實驗通過飼料添加轉基因乳酸桿菌可滿足各種家禽需要；轉基因家禽可能存在食物安全性問題，將轉基因乳酸桿菌加入飼料比較安全；轉基因乳酸桿菌易擴大培養，生產成本低
家禽轉基因難度大，成本高，且通過家禽轉基因只能改造一種家禽，本實驗通過飼料添加轉基因乳酸桿菌可滿足各種家禽需要；轉基因家禽可能存在食物安全性問題，將轉基因乳酸桿菌加入飼料比較安全；轉基因乳酸桿菌易擴大培養，生產成本低
（寫出2點）。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】B；MfeⅠ、HindⅢ；EcoRⅠ、HindⅢ；氨芐青霉素；導入空質粒（或“空載體”）的乳酸桿菌；抗原-抗體雜交；（家禽）受精卵；家禽轉基因難度大，成本高，且通過家禽轉基因只能改造一種家禽，本實驗通過飼料添加轉基因乳酸桿菌可滿足各種家禽需要；轉基因家禽可能存在食物安全性問題，將轉基因乳酸桿菌加入飼料比較安全；轉基因乳酸桿菌易擴大培養，生產成本低
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：29引用：1難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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