1977年,曾經(jīng)兩度獲得諾貝爾化學(xué)獎的生物化學(xué)家Sanger等人建立一種DNA測序方法——雙脫氧鏈末端終止法。其原理是利用四種2',3'雙脫氧核營三磷酸(ddNTP)代替部分脫氧核苷三磷酸(dNTP)作底物參與DNA的合成。每一次序列測定由一套四個單獨(dú)的反應(yīng)構(gòu)成,每個反應(yīng)含有所有四種脫氧核苷三磷酸(dNTP),并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。例如:添加了腺嘌呤雙脫氧核苷三磷酸(ddATP)的反應(yīng)體系中,DNA子鏈延伸時ddATP缺乏所需要的3'-OH基團(tuán),該核苷酸鏈在模板鏈為T處終止。這套四個反應(yīng)體系得到的所有片段具有共同的起始點(diǎn),但終止在不同種的核苷酸上,對這些大小不同的片段進(jìn)行檢測從而分析得到DNA片段的序列(如下圖所示)。請回答下列問題:

(1)示意圖的體外反應(yīng)體系中需用高溫解開DNA分子的雙鏈,細(xì)胞內(nèi)無法實(shí)現(xiàn)高溫,是在 解旋解旋酶的作用下實(shí)現(xiàn)解鏈的。反應(yīng)體系DNA復(fù)制過程中遵循 堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對原則,利用 DNA聚合DNA聚合酶使子鏈不停延伸。下圖左左(填“左”或“右”)為ddNTP,因?yàn)槠涿撗鹾颂堑?'位置缺少 —OH或羥基—OH或羥基,故不能與后續(xù)的dNTP形成化學(xué)鍵導(dǎo)致子鏈合成終止。

(2)圖1、2表示利用該方法測出的兩個DNA片段的一條鏈的堿基排列順序。

據(jù)圖1推測,此DNA片段上的鳥嘌呤脫氧核苷酸的數(shù)量是 77個。圖2顯示的脫氧核苷酸鏈堿基序列為 AGCAGTAGTATGCATAGCAGTAGTATGCAT(從上往下序列)。兩個DNA片段得到了不同的檢測結(jié)果說明DNA分子具有 特異(或多樣)特異(或多樣)性。圖中所測定的兩個DNA片段堿基總數(shù)不同,但其中(A+G)(T+C)總是=11。
(3)對于某些病毒,比如人類免疫缺陷病病毒、流感病毒等,基因是有遺傳效應(yīng)的 RNA片段RNA片段。
(
A
+
G
)
(
T
+
C
)
【答案】解旋;堿基互補(bǔ)配對;DNA聚合;左;—OH或羥基;7;AGCAGTAGTATGCAT;特異(或多樣);1;RNA片段
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:1難度:0.6
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1.將含15N/15N-DNA的大腸桿菌為親代,以14NH4Cl為唯一氮源培養(yǎng)兩代。下列有關(guān)敘述正確的是( )
A.培養(yǎng)過程中,大腸桿菌將利用NH4Cl中的N合成DNA的基本骨架 B.通過對這三代大腸桿菌DNA的密度梯度離心,可得出DNA復(fù)制的特點(diǎn)為半保留復(fù)制 C.將子二代大腸桿菌DNA的密度梯度離心,離心管中將出現(xiàn)1個條帶 D.將親代的大腸桿菌繁殖一代后,若將提取的子代大腸桿菌DNA解旋處理后進(jìn)行密度梯度離心,離心管中出現(xiàn)1個條帶 發(fā)布:2025/1/21 8:0:1組卷:9引用:1難度:0.7 -
2.研究人員分別在15NH4Cl和14NH4Cl的培養(yǎng)液中培養(yǎng)大腸桿菌,用以研究DNA的復(fù)制特點(diǎn)。甲圖代表的化合物由①、②、③三部分構(gòu)成;乙圖是利用密度梯度離心技術(shù)將提取到的大腸桿菌DNA進(jìn)行檢測得到的結(jié)果。下列有關(guān)說法錯誤的是( )
A.將大腸桿菌在15NH4Cl培養(yǎng)液中培養(yǎng)很多代后,取其DNA離心檢測,可得Ⅱ所示結(jié)果 B.將大腸桿菌在14NH4Cl培養(yǎng)液中培養(yǎng)很多代后,取其DNA離心檢測,可得Ⅰ所示結(jié)果 C.將15N標(biāo)記的大腸桿菌置于14NH4Cl培養(yǎng)液中培養(yǎng)2代后,取其DNA離心檢測,可得Ⅲ所示結(jié)果 D.將14N標(biāo)記的大腸桿菌置于15NH4Cl培養(yǎng)液中培養(yǎng)2代后,取其DNA離心檢測,可得Ⅲ所示結(jié)果 發(fā)布:2025/1/21 8:0:1組卷:6引用:2難度:0.7 -
3.下列關(guān)于“堿基互補(bǔ)配對原則”和“DNA復(fù)制特點(diǎn)”具體應(yīng)用的敘述,不正確的是( )
A.用經(jīng)3H標(biāo)記的n個噬菌體侵染大腸桿菌,在普通培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中共有噬菌體后代m個.則此時培養(yǎng)基中含有被標(biāo)記的噬菌體的比例最高是 2nmB.已知一段信使RNA有30個堿基,其中A+U有12個,那么轉(zhuǎn)錄成信使RNA的一段DNA分子中應(yīng)有30個C+G C.如果將含有1對同源染色體的精原細(xì)胞的2個DNA分子都用15N標(biāo)記,并只供給精原細(xì)胞含14N的原料,該細(xì)胞進(jìn)行1次有絲分裂后再減數(shù)分裂1次,產(chǎn)生的8個精細(xì)胞中(無交叉互換現(xiàn)象),含15N、14N標(biāo)記的DNA分子的精子所占的比例依次是50% 和100% D.假如一個DNA分子含有1000個堿基對,將這個DNA分子放在用32P標(biāo)記的脫氧核苷酸的培養(yǎng)液中讓其復(fù)制一次,則新形成DNA分子的分子量比原來增加了1000 發(fā)布:2025/1/21 8:0:1組卷:99引用:4難度:0.7