表觀遺傳調節異常是腫瘤發生發展的重要因素之一，N6-甲基腺苷（m6A）是真核生物mRNA上最常見的一種修飾。研究發現，胃癌細胞中存在m6A去甲基化酶（ALKBH5）過表達和STC2（癌癥相關基因）mRNA的m6A修飾水平降低的異常現象。科研人員利用基因工程技術實現ALKBH5基因沉默和STC2基因的過表達，以研究ALKBH5介導的m6A甲基化修飾對胃癌細胞遷移的影響。
（1）已知STC2基因的α鏈為轉錄的模板鏈，據圖1分析，利用PCR擴增目的基因時，需要在引物 CC的5'端添加BamHⅠ識別序列和強啟動子序列，在引物 BB的5'端添加SacⅠ識別序列。
（2）為確保目的基因正確插入質粒，需要選擇 BamHⅠ、SacⅠBamHⅠ、SacⅠ限制酶切割質粒。將重組質粒導入大腸桿菌體時，可利用潮霉素和卡那霉素篩選出導入重組質粒的大腸桿菌，試簡要表述篩選思路：依次使用含卡那霉素的培養基和含潮霉素的培養基篩選，能夠在含卡那霉素培養基中生長，而不能在含潮霉素培養基中生長的大腸桿菌即為導入重組質粒的大腸桿菌依次使用含卡那霉素的培養基和含潮霉素的培養基篩選，能夠在含卡那霉素培養基中生長，而不能在含潮霉素培養基中生長的大腸桿菌即為導入重組質粒的大腸桿菌。
（3）研究人員分別用不同方式處理胃癌細胞，并測得胃癌細胞遷移標志蛋白含量如圖3。根據結果推測ALKBH5基因影響胃癌遷移的機理是 ALKBH5基因過表達導致ST2基因表達的mRNA去甲基化，進而導致STC2基因過表達而引起癌細胞遷移ALKBH5基因過表達導致ST2基因表達的mRNA去甲基化，進而導致STC2基因過表達而引起癌細胞遷移。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】C；B；BamHⅠ、SacⅠ；依次使用含卡那霉素的培養基和含潮霉素的培養基篩選，能夠在含卡那霉素培養基中生長，而不能在含潮霉素培養基中生長的大腸桿菌即為導入重組質粒的大腸桿菌；ALKBH5基因過表達導致ST2基因表達的mRNA去甲基化，進而導致STC2基因過表達而引起癌細胞遷移
【解答】
【點評】
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發布：2024/8/9 8:0:9組卷：31引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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