異丁醇具有燃值高、能量密度高等優點，其開發和利用對優化我國能源結構和保護環境有非常重要的意義?？蒲腥藛T構建了一種表達載體pUC18（如圖1）導入酵母菌，用于過量表達ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以期實現大規模生產異丁醇。圖2是酵母細胞中葡萄糖代謝產生異丁醇、乙醇和乙酸的示意圖，其中基因ADHs和ALDs分別控制E酶和F酶的合成。回答下列問題：
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（1）將基因ILV2、ILV5、ILV3和AR010依次插入到質粒上的目的基因插入位點，選用高表達啟動子pTEF1和 終止子終止子作為調控序列。pTEF1是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結合的位點。
（2）科研人員先將pUC18轉化到大腸桿菌細胞中，以便篩選、保存和擴增重組質粒。重組質粒上的 原核原核（填“真核”或“原核”）生物復制原點使pUC18能在大腸桿菌中擴增。已知氨芐青霉素抑制細菌細胞壁的合成，pUC18中氨芐青霉素抗性基因的作用是 作為標記基因用于篩選出含有重組質粒（或目的基因）的大腸桿菌細胞作為標記基因用于篩選出含有重組質粒（或目的基因）的大腸桿菌細胞。
（3）提取完整的重組pUC18并導入組氨酸缺陷型釀酒酵母細胞中，將菌株接種在培養基中以獲得單菌落，該過程稱為微生物的 選擇選擇培養。除必要的營養物質外，該選擇培養基中需要添加的物質是 CC。
A．組氨酸
B．氨芐青霉素
C．瓊脂
（4）根據圖示酵母細胞葡萄糖的代謝途徑，為了進一步提高異丁醇的產量，應對基因 ADHs和ALDsADHs和ALDs進行改造使其表達產物減少。
【答案】終止子；RNA聚合酶；原核；作為標記基因用于篩選出含有重組質粒（或目的基因）的大腸桿菌細胞；選擇；C；ADHs和ALDs
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/9 8:0:8組卷：6引用：3難度：0.5
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