IL-6（白細胞介素6）在體內過量表達會引發(fā)多種免疫性疾病。在免疫療法中，利用人源IL-6抗體結合過量的IL-6進行治療比使用鼠源IL-6單抗效果更好、風險更小。科研人員利用農桿菌轉化法將人源IL-6抗體基因轉入某種植物中并成功表達。回答下列問題：
（1）將IL-6注射到小鼠體內，取小鼠脾臟細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出 能產生特異性IL-6抗體的雜交瘤細胞能產生特異性IL-6抗體的雜交瘤細胞進行擴大培養(yǎng)，可規(guī)模化生產鼠源IL-6抗體。與人源抗體相比，前者在實際應用中除了可能因免疫排斥導致效果較差外，還可能具有的潛在風險是 引起過敏反應引起過敏反應。
（2）用限制性內切核酸酶和DNA連接酶處理人源IL-6抗體基因與 Ti質粒Ti質粒，構建表達載體，再將其與經(jīng) Ca2+Ca2+處理的農桿菌共培養(yǎng)。培養(yǎng)農桿菌的培養(yǎng)基成分通常包括蛋白胨、酵母浸出液、無機鹽和水，其中蛋白胨可以為農桿菌提供哪些營養(yǎng)成分 ABDABD。
A．碳源
B．氮源
C．抗生素
D．維生素
（3）利用篩選后的農桿菌感染植物愈傷組織后，將愈傷組織置于含有抗生素的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，抗生素的作用是篩選轉化成功的愈傷組織細胞及 殺滅農桿菌殺滅農桿菌。在適宜配比的激素誘導下，細胞不斷分裂，并經(jīng) 再分化再分化過程形成胚狀體，繼續(xù)發(fā)育形成試管苗。試管苗移栽到土壤前，通常需在經(jīng) 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌的珍珠巖或蛭石中進行煉苗。
（4）利用凝膠電泳和分子雜交技術檢測人源IL-6抗體基因是否成功表達。完善以下實驗思路：
①將幼苗葉片液氮冷凍并 研磨研磨，用苯酚法提取葉片總蛋白，制成樣品。
②將 凝膠凝膠置于緩沖溶液中，再向加樣孔中加入蛋白樣品，由于人源IL-6抗體是酸性蛋白質，所以加樣孔應朝向 負負極。
③電泳分離結束，轉移到PVDF膜上，利用 抗原—抗體分子雜交抗原—抗體分子雜交技術進行檢測。
（5）在利用植物體作為生物反應器進行人源IL-6抗體規(guī)模化生產前，除對表達劑量進行檢測外，還需要對抗體的 活性活性進行檢測。進一步研究發(fā)現(xiàn)，轉基因植物葉片中人源IL-6抗體表達水平較低，這與植物葉肉細胞中基因X的表達有關。可采取基因敲除技術將neo基因定向插入到基因X中，使其表達失活。在使用PCR檢測基因X是否被敲除時，至少一側的引物需要根據(jù) neo基因neo基因的堿基序列設計。
【答案】能產生特異性IL-6抗體的雜交瘤細胞；引起過敏反應；Ti質粒；Ca2+；ABD；殺滅農桿菌；再分化；高壓蒸汽滅菌；研磨；凝膠；負；抗原—抗體分子雜交；活性；neo基因
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：30引用：2難度：0.7
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細胞表面的信號調節(jié)蛋白結合，從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6～5倍，導致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。科學家推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結合，目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細胞技術（免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術）生產能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題：
（1）與植物體細胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長。
（2）對③篩選出的雜交瘤細胞，還需進行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是（答出一點）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞會因為、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏等因素而分裂受阻，需進行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結合后給藥，對人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5 -
3．使用高效的細胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應用。抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成，它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7