如下是基因工程的基本操作步驟,請回答下列問題:
①目的基因的獲取→②→③將目的基因導入受體細胞→④目的基因的檢測與鑒定
(1)欲從一個完整的DNA中獲取某目的基因,需要用到限制性核酸內切(或限制)限制性核酸內切(或限制)酶進行切割。再利用PCR技術擴增目的基因,若該目的基因擴增n代,則產生的子代DNA分子中含有新加入引物的單鏈有2n+1-22n+1-2條。
(2)步驟②為基因表達載體的構建基因表達載體的構建,其是基因工程的核心。若通過步驟②獲得如圖所示結構,其中抗氨芐青霉素基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。
(3)將目的基因導入大腸桿菌,常用Ca2+處理大腸桿菌,使其成為感受態感受態細胞。采用農桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞,必須先將目的基因導入Ti質粒的T-DNA內,原因是T-DNA具有可轉移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上可轉移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上的特點。
(4)步驟④中首先要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因,這是目的基因能否在受體細胞中穩定遺傳的關鍵,為檢測目的基因在轉基因生物中是否成功表達,可采用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交技術。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制性核酸內切(或限制);2n+1-2;基因表達載體的構建;鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來;感受態;可轉移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上;轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發布:2024/4/20 14:35:0組卷:6引用:1難度:0.6
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