“基因剪刀手”楊璐菡掃除了豬器官用于人體移植的最大障礙，其研究成果使得美國(guó)《科學(xué)》雜志打破慣例提前發(fā)表科研成果，該技術(shù)將為全球上百萬(wàn)病人帶來(lái)希望。從2014年起，楊璐菡作為異種器官移植課題帶頭人，帶領(lǐng)10個(gè)人的科研團(tuán)隊(duì)利用新發(fā)明的“基因剪刀”技術(shù)，敲除豬基因組中可能的致病基因。“基因敲除”技術(shù)的主要過(guò)程示意圖如圖：

請(qǐng)根據(jù)題述內(nèi)容回答下列問(wèn)題：
（1）“基因敲除”技術(shù)的原理是

基因重組

基因重組

，將neo^R基因插入到靶基因過(guò)程中使用的工具酶是

限制酶

限制酶

和

DNA連接酶

DNA連接酶

。
（2）將突變基因DNA導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞之前要

構(gòu)建基因表達(dá)載體

構(gòu)建基因表達(dá)載體

，該操作的目的是

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并發(fā)揮作用

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并發(fā)揮作用

，該步驟中常用不同的限制酶進(jìn)行切割，這樣做的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止

質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化

質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化

。
（3）要獲得一只含失活靶基因的小鼠，則選擇的受體細(xì)胞應(yīng)是

受精卵

受精卵

，圖中的neo^R基因的作用是

獲得失活的靶基因

獲得失活的靶基因

。
（4）用于器官移植的豬最終需要完成基因改造及PERV（豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒）的刪除等工作，改造過(guò)的豬胚胎可植入母豬體內(nèi)，胚胎在母豬體內(nèi)存活的原因是

受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

。