回答與基因工程和植物克隆有關的問題：
（1）從水稻體細胞中提取總RNA，利用 逆轉錄逆轉錄酶獲得B基因編碼蛋白的序列，將該序列和Luc基因（表達的熒光素酶能催化熒光素產生熒光）連接成的融合基因必須連接到表達載體的啟動子和終止子之間，其中啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶的結合位點。
（2）將重組載體導入農桿菌時，常用氯化鈣處理農桿菌的目的是 增加農桿菌細胞壁的通透性增加農桿菌細胞壁的通透性。處理后再將農桿菌轉移到適宜培養液中培養一段時間，目的是 使農桿菌恢復正常生理狀態使農桿菌恢復正常生理狀態。
（3）過程②利用了農桿菌的T-DNA片段，將目的基因 整合（或轉移）整合（或轉移）到受體細胞的染色體DNA上，完成后需在培養基中添加 潮霉素潮霉素對水稻愈傷組織進行脫菌處理。
（4）借助Luc基因的表達來完成第二次鑒定篩選，具體方法是 檢測加入熒光素的細胞中是否發出熒光檢測加入熒光素的細胞中是否發出熒光。
（5）在植物克隆中，盡量選擇 性狀優良、細胞全能性表達充分性狀優良、細胞全能性表達充分的基因型。有研究人員將上述水稻愈傷組織反復擴增后再誘導，都以失敗告終，原因是在 多次繼代培養多次繼代培養后喪失細胞全能性的表達能力。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；RNA聚合酶；增加農桿菌細胞壁的通透性；使農桿菌恢復正常生理狀態；整合（或轉移）；潮霉素；檢測加入熒光素的細胞中是否發出熒光；性狀優良、細胞全能性表達充分；多次繼代培養
【解答】
【點評】
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發布：2024/9/27 11:0:2組卷：2引用：2難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6