三氯生是一種抑菌物質，具有優異的貯存穩定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發現的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。
（1）通過PCR方法獲取fabV基因時，Taq酶只能從 引物的3′端引物的3′端延伸DNA鏈，而不能從頭開始合成DNA，因此需要先根據 目的基因fabV基因兩端堿基序列目的基因fabV基因兩端堿基序列設計兩種特異性引物序列。反應體系的初始溫度設置在90～95℃的目的是 使fabV基因受熱變性后解為單鏈使fabV基因受熱變性后解為單鏈。
（2）在④步驟中，科研者需將大腸桿菌菌液利用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法接種到加有 三氯生三氯生的細菌培養基上，待菌落長成后，直接挑取菌落加入到PCR反應系統中進行基因鑒定。PCR過程中不需要先提取細菌DNA的原因是 大腸桿菌屬于原核生物，其DNA是裸露的，可以直接作為PCR模板，且PCR變性階段的高溫可直接殺死細菌，使其釋放DNA大腸桿菌屬于原核生物，其DNA是裸露的，可以直接作為PCR模板，且PCR變性階段的高溫可直接殺死細菌，使其釋放DNA。
（3）某科研團隊將可以受溫度調控的基因插入上述選出的重組質粒中，構建了溫度調控表達質粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會抑制P1，R基因在高溫下會抑制P2。如果將lacZ基因和GFP基因插入圖2質粒中，使得最后表現為低溫下只表達GFP蛋白，而高溫下只表達lacz蛋白。則lacZ基因插在 P1→T1P1→T1之間，GFP基因插在 P2→T2P2→T2之間。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】引物的3′端；目的基因fabV基因兩端堿基序列；使fabV基因受熱變性后解為單鏈；稀釋涂布平板；三氯生；大腸桿菌屬于原核生物，其DNA是裸露的，可以直接作為PCR模板，且PCR變性階段的高溫可直接殺死細菌，使其釋放DNA；P1→T1；P2→T2
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：33引用：3難度：0.5
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1．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
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