將外源多酚氧化酶基因（POT33）的同源片段與載體結合，構建反義表達載體，通過基因工程技術導入馬鈴薯，產生的反義RNA可有效降低馬鈴薯內源多酚氧化酶基因的表達水平，從而改善薯塊的損傷褐化現象，提高馬鈴薯的食用和加工品質。回答下列相關問題：
（1）獲取馬鈴薯POT33基因的同源片段：根據馬鈴薯POT33基因的 核苷酸的排列順序核苷酸的排列順序設計一對特異性引物，在引物的5′端加入限制性內切核酸酶的 識別序列識別序列以滿足目的基因連接到載體的需要，再通過PCR獲取馬鈴薯POT33基因的同源片段。
（2）構建重組載體：用限制性內切核酸酶分別處理 目的基因和載體目的基因和載體，處理過程中用兩種限制酶，可以防止目的基因以及載體的 自身環化自身環化，保證POT33基因同源片段與載體的反向連接，形成反義表達載體。
（3）馬鈴薯轉化、選擇及再生：以馬鈴薯無菌苗的葉片為外植體，一般可借助 農桿菌農桿菌實現馬鈴薯的遺傳轉化，再將被轉化的葉片放在含抗生素的培養基上培養，加入的抗生素具有篩選轉化細胞和 殺滅農桿菌殺滅農桿菌的雙重作用；之后對脫分化形成的愈傷組織每隔適當時間進行 繼代繼代培養，后可通過調控培養基中 植物生長調節劑和營養物質的種類和濃度植物生長調節劑和營養物質的種類和濃度以獲得符合要求的再生植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養．
【答案】核苷酸的排列順序；識別序列；目的基因和載體；自身環化；農桿菌；殺滅農桿菌；繼代；植物生長調節劑和營養物質的種類和濃度
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優網所有，未經書面同意，不得復制發布。
發布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.7
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3難度：0.7
相關試卷