針對病毒的疫苗有重組蛋白疫苗、核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等。如圖為其中某病毒一種疫苗的研發思路，圖中①～⑦表示過程，B圖中箭頭指示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點（四種酶的識別序列詳見表），標記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養基中的蔗糖生存。

限制酶	NeoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
識別序列和切割位點	C↓CATGGG	CATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

（1）圖中①過程需要先通過

逆轉錄

逆轉錄

過程得到cDNA，再利用PCR擴增S基因，若擴增5個循環，則需要引物

62

62

個。
（2）為使③過程順利進行，需先使用限制藥

NcoⅠ

NcoⅠ

和

NheⅠ

NheⅠ

切割質粒B。
（3）為達到利用標記基因篩選的目的，非轉基因的普通P型酵母菌應該滿足的條件是

自身不能合成蔗糖酶

自身不能合成蔗糖酶

。
（4）重組疫苗注入志愿者體內后，S蛋白基因指導合成的S蛋白作

抗原

抗原

。刺激機體產生能與之相結合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標，參加臨床試驗的志愿者需要滿足的條件之一是

無

無

（填“有”或“無”）該病毒感染史。