人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白。如圖表示利用乳腺生物反應器生產人乳鐵蛋白的部分過程。圖中Tet表示四環素抗性基因，Amp表示氨芐青霉素抗性基因，四種限制酶的識別序列及切割位點如表所示。回答下列問題：
| 限制酶 | BamHⅠ | HaeⅢ | BclⅠ | NotⅠ |
| 識別序列 及切割位點 |
G↓GATCC CCTAG↑G |
GG↓CC CC↑GG |
T↓GATCA ACTAG↑T |
GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG |
人體發育某個時期的mRNA經反轉錄產生DNA片段，與載體連接后導入受體菌群體儲存
人體發育某個時期的mRNA經反轉錄產生DNA片段，與載體連接后導入受體菌群體儲存
。（2）為構建重組載體，應選擇
BamHⅠ和BclⅠ
BamHⅠ和BclⅠ
酶對目的基因和質粒進行切割。將上述酶切后得到DNA末端連接起來，連接部位的6個堿基對序列為 
（3）以大腸桿菌為受體細胞，將酶切后的連接產物導入受體細胞。為篩選出導入目的基因的受體菌，首先需要將得到的上述大腸桿菌接種到含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
培養基（A）上，一段時間后，將A上生長的菌落拓印到含四環素
四環素
培養基（B）上，在B上能生長的 不是
不是
（填“是”或“不是”）成功導入重組質的受體菌。經檢測，部分含有重組質粒的大腸桿菌菌株中目的基因不能表達，其最可能的原因是 用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因與質粒反向連接
用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因與質粒反向連接
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】人體發育某個時期的mRNA經反轉錄產生DNA片段，與載體連接后導入受體菌群體儲存；BamHⅠ和BclⅠ；；氨芐青霉素；四環素；不是；用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因與質粒反向連接
；氨芐青霉素；四環素；不是；用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因與質粒反向連接【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：3引用：2難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6