蘇云金芽孢桿菌中含有一種抗蟲基因（Bt基因），通過產生蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體蛋白（Bt抗蟲蛋白），破壞鱗翅目昆蟲的消化系統來殺死棉鈴蟲。科學家將該細菌的“殺蟲基因”轉移到棉花里，培育出了抗蟲棉，讓棉花也能產生Bt抗蟲蛋白抵抗蟲害。如圖中箭頭處為EcoRⅠ或BamHⅠ限制酶的酶切位點，回答下列問題：
（1）基因工程中把Bt基因稱為 目的基因目的基因，可利用PCR技術獲取并擴增B基因，前提是要有一段已知的Bt基因的核苷酸序列，這是因為 利用PCR技術擴增目的基因需要兩種引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列利用PCR技術擴增目的基因需要兩種引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。
（2）構建重組質粒時，可將Bt基因連接到質粒的T-DNA序列中，這樣做的意義是 T-DNA序列可將目的基因整合到宿主細胞的染色體DNA上T-DNA序列可將目的基因整合到宿主細胞的染色體DNA上。
（3）實際操作中，一般采用EcoRⅠ和BamHⅠ兩種酶進行切割。與只采用EcoRⅠ酶切割相比，用兩種酶切割的優勢：一是避免 目的基因和質粒自身環化目的基因和質粒自身環化，二是避免 造成反向連接造成反向連接。
（4）檢測到Bt基因導入宿主細胞后還要檢測目的基因是否表達Bt毒蛋白，常用的方法是 抗原─抗體雜交抗原─抗體雜交，轉基因棉花是否培育成功還要對棉花進行 抗蟲接種抗蟲接種檢驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因；利用PCR技術擴增目的基因需要兩種引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；T-DNA序列可將目的基因整合到宿主細胞的染色體DNA上；目的基因和質粒自身環化；造成反向連接；抗原─抗體雜交；抗蟲接種
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：2難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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