研究人員利用AFPs抗凍基因和Ti質粒構建重組質粒，選擇所需重組質粒轉入番茄植株，培育抗凍番茄，主要操作過程如圖。抗凍番茄經低溫誘導后可溶性蛋白均比對照明顯增加，通過聚丙烯酰胺凝膠電泳可檢測到可溶性蛋白的C區和B區染色加深。已知三種限制酶的識別序列及酶切位點如表所示。請回答下列問題：
| 限制酶 | BamHⅠ | BglⅡ | EcoRⅠ |
| 識別序列及酶切位點 | -G↓GATCC- | -A↓GATCT- | -G↓AATTC- |
BamHⅠ
BamHⅠ
、BglⅡ
BglⅡ
（酶）分別切割質粒和含AFPs抗凍基因的外源DNA。（2）培育轉基因植物時，常選擇Ti質粒作為目的基因載體的原因是
Ti質粒上有T-DNA，可將外源基因導入受體細胞染色體DNA上
Ti質粒上有T-DNA，可將外源基因導入受體細胞染色體DNA上
。將導入了表達載體的農桿菌與取自番茄的細胞共同培養，通過農桿菌的 轉化
轉化
作用就可使目的基因進入番茄細胞，為篩選成功導入抗凍基因的番茄細胞，需在培養基中添加 卡那霉素
卡那霉素
。通過過程④獲得完整的植株，依據的原理是 植物細胞的全能性
植物細胞的全能性
。與常規的種子繁殖方法相比，利用該技術培育抗凍番茄植株的優點是 打破了常規育種中難以突破的種間界限。實現了不同物種間的基因交流，從而大幅度的改良植物的遺傳特性
打破了常規育種中難以突破的種間界限。實現了不同物種間的基因交流，從而大幅度的改良植物的遺傳特性
。（3）可通過聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測經低溫誘導后抗凍番茄植株中的可溶性蛋白，若
可溶性蛋白的C區和B區染色加深
可溶性蛋白的C區和B區染色加深
，則表明AFPs基因已表達出相應的蛋白質；也可采用 低溫處理番茄植株，并與非轉基因植物對照
低溫處理番茄植株，并與非轉基因植物對照
進行個體生物學水平的檢測。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHⅠ；BglⅡ；Ti質粒上有T-DNA，可將外源基因導入受體細胞染色體DNA上；轉化；卡那霉素；植物細胞的全能性；打破了常規育種中難以突破的種間界限。實現了不同物種間的基因交流，從而大幅度的改良植物的遺傳特性；可溶性蛋白的C區和B區染色加深；低溫處理番茄植株，并與非轉基因植物對照
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/20 8:0:9組卷：1引用：1難度：0.6
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