如圖為利用基因工程生產乙肝疫苗的過程，質粒上箭頭所指部位為相應的限制酶切割位點。質粒中lacZ基因編碼產生的酶可以分解培養基中的XgaⅠ，產生藍色物質，使菌落呈現藍色，否則菌落為白色。回答下列問題：
（1）利用PCR技術擴增目的基因時需要的酶為 耐高溫DNA 聚合酶耐高溫DNA 聚合酶；此過程還需要引物，其作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，若將1個目的基因擴增n次，則需要引物 2（2n-1）2（2n-1）個。
（2）①過程為了防止目的基因與質粒任意連接，應選擇 EcoR I、BamH IEcoR I、BamH I限制酶分別切割目的基因和質粒，并將切割后的質粒和目的基因用 DNA連接DNA連接酶連接形成重組質粒，該重組質粒除了含有目的基因和標記基因外，還應含有 啟動子、終止子啟動子、終止子（寫出2點）等結構。
（3）過程②一般用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌。為了篩選成功導入重組質粒的大腸桿菌，可將大腸桿菌接種到含有 X-gal和青霉素X-gal和青霉素的固體培養基上，挑選顏色為 白色白色（填“藍色”或“白色”）的菌落進一步培養。
（4）除圖示方法外，還可利用乳腺生物反應器生產乙肝疫苗，該過程需要將目的基因與 乳腺中特異表達的基因乳腺中特異表達的基因啟動子相連，并通過 顯微注射顯微注射方法將重組質粒導入到動物的受精卵中，由這個受精卵發育成的轉基因動物進入泌乳期后，通過分泌乳汁即可獲得乙肝抗原蛋白。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】耐高溫DNA 聚合酶；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；2（2n-1）；EcoR I、BamH I；DNA連接；啟動子、終止子；Ca2+；X-gal和青霉素；白色；乳腺中特異表達的基因；顯微注射
【解答】
【點評】
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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