四尾柵藻具有環境適應能力強和生長速度快等優點，如果能將其進行品種改良，提高含油量，有望解決微藻生物柴油產業化進程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術將油料作物紫蘇DGAT1基因導入四尾柵藻，獲得轉基因的產油微藻，利用地熱廢水培養，不僅能生產生物柴油，還能治理地熱廢水。操作過程如下圖，請回答下列問題：
注：LacZ基因編碼產生的酶可以分解物質X-gal,從而使菌落顯現出藍色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落呈白色。
（1）將質粒pMD19-DGAT1導入大腸桿菌前，通常先用Ca2+處理大腸桿菌，使細胞處于一種 能吸收周圍環境中DNA分子能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態。
（2）圖中接種大腸桿菌的培養基pH一般為 中性或弱堿性中性或弱堿性。為了便于重組質粒的篩選，該選擇培養基中應添加 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal。導入 沒有連接目的基因的質粒（或空質粒；或pMD19質粒）沒有連接目的基因的質粒（或空質粒；或pMD19質粒）的大腸桿菌菌落成藍色，導入 重組質粒（或pMD19-DGAT1質粒）重組質粒（或pMD19-DGAT1質粒）的大腸桿菌菌落成白色。
（3）由上圖推測，用 BamHⅠBamHⅠ和 XbaⅠXbaⅠ酶切割pMD19-DGAT1獲得 DGAT1基因，并與酶切后的載體pBI121連接再次構建基因表達載體，用這兩種酶切割的目的是 保證其準確插入質粒并防止其出現自身環化等問題（或防止反向連接和自身環化）保證其準確插入質粒并防止其出現自身環化等問題（或防止反向連接和自身環化）。
（4）為檢測轉基因四尾柵藻對地熱廢水的去污能力，研究人員設計實驗并得到相應實驗結果如表。
| 指標 | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養轉基因四尾柵藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
應添加對照組：廢水培養非轉基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
應添加對照組：廢水培養非轉基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】能吸收周圍環境中DNA分子；中性或弱堿性；氨芐青霉素和X-gal；沒有連接目的基因的質粒（或空質粒；或pMD19質粒）；重組質粒（或pMD19-DGAT1質粒）；BamHⅠ；XbaⅠ；保證其準確插入質粒并防止其出現自身環化等問題（或防止反向連接和自身環化）；應添加對照組：廢水培養非轉基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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