金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結合蛋白，某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反應（PCR）擴增獲得目的基因，構建轉基因工程菌，用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴增過程示意圖如圖所示，請回答下列問題：
（1）從高表達MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過逆轉錄逆轉錄獲得cDNAcDNA用于PCR擴增。
（2）設計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物（引物1和引物2），為方便構建重組質粒，在引物中需要增加適當的限制性內切核酸酶限制性內切核酸酶位點。設計引物時需要避免引物之間形成堿基互補配對堿基互補配對，而造成引物自連。
（3）圖中步驟1代表變性變性，步驟2代表退火，步驟3代表延伸，這三個步驟組成一輪循環。
（4）如果PCR反應得不到任何擴增產物，則可以采取的改進措施有②③②③（填序號：①升高退火溫度 ②降低退火溫度 ③重新設計引物）。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】逆轉錄；cDNA；限制性內切核酸酶；堿基互補配對；變性；②③
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：14引用：2難度：0.7
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1．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7