[選修3：現代生物科技專題]
蛋白酶抑制劑基因轉化是作物抗蟲育種的新途徑。某研究團隊將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPinlA）的基因單獨或共同轉化棉花，獲得了轉基因植株。
回答下列問題：
（1）蛋白酶抑制劑的抗蟲機制是

阻斷或減弱消化酶的作用，導致害蟲無法對外來蛋白有消化作用而發育異?；蛩劳?/div>

阻斷或減弱消化酶的作用，導致害蟲無法對外來蛋白有消化作用而發育異常或死亡

。
（2）

基因表達載體的構建

基因表達載體的構建

是實施基因工程的核心。
（3）利用農桿菌轉化法時，必須將目的基因插入到質粒的

T-DNA

T-DNA

上，此方法的不足之處是

農桿菌轉化法適用于大多數雙子葉植物和裸子植物，不適用單子葉植物

農桿菌轉化法適用于大多數雙子葉植物和裸子植物，不適用單子葉植物

。
（4）為檢測目的基因在受體細胞基因組中的整合及其轉錄和翻譯，可采用的檢測技術有

DNA分子雜交技術、分子雜交技術、抗原—抗體雜交技術

DNA分子雜交技術、分子雜交技術、抗原—抗體雜交技術

（寫出兩點即可）。
（5）確認抗蟲基因在受體細胞中穩定表達后，還需進一步做抗蟲的

接種實驗

接種實驗

以鑒定其抗性程度。圖為三種不同遺傳操作產生的轉基因棉花抗蟲實驗結果，據結果分析

NaPI+StPinlA

NaPI+StPinlA

（填“NaPI”或“StPinlA”或“NaPI+StPinlA”）轉基因棉花的抗蟲效果最佳，其原因是

由于導入NaPI+StPinlA抗蟲基因后，蟲體質量輕，蟲體不能成活，且棉鈴數量最多，所以第3組抗蟲效果最好

由于導入NaPI+StPinlA抗蟲基因后，蟲體質量輕，蟲體不能成活，且棉鈴數量最多，所以第3組抗蟲效果最好

。

（6）基因突變可產生新的等位基因，在自然選擇的作用下，昆蟲種群的基因頻率會發生

定向改變

定向改變

。導致昆蟲朝著一定的方向不斷進化。據此推測，被蛋白抑制劑基因作物長期選擇后，某些昆蟲具有了抗蛋白酶抑制劑的能力，其分子機制可能是

DNA分子中發生堿基對的替換、增添或缺失

DNA分子中發生堿基對的替換、增添或缺失

（寫出兩點即可）。