研究者篩選到一株降解纖維素能力較強的枯草芽孢桿菌菌株（B菌），從中獲得一種纖維素酶（C1酶）基因。將C1酶基因與高效表達載體（HT質粒）連接，再導入B菌，以期獲得降解纖維素能力更強的工程菌。熒光定量PCR技術可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是在PCR體系中每加入一對引物的同時加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針，當Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會水解探針，使熒光監測系統接收到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成。在檢測過程中，隨著PCR的進行，反應產物不斷累積，“雜交雙鏈”熒光信號的強度也等比例增加。可通過熒光強度的變化監測產物量的變化從而得到一條熒光擴增曲線圖（如圖1）。
注：DNA的轉錄方向是RNA的合成方向，即5'端到3'端。
回答下列問題：
（1）啟動子的基本組成單位是 脫氧核苷酸脫氧核苷酸，能識別啟動子的酶是 RNA聚合酶RNA聚合酶。
（2）熒光定量PCR儀能監測出熒光到達預先設定閾值的循環數（Ct值），病毒核酸濃度越高，Ct值越 小小。
（3）“平臺期”出現的最可能的原因是 試劑盒中的原料、引物和探針數量一定，超出一定循環數后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加試劑盒中的原料、引物和探針數量一定，超出一定循環數后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加。
（4）圖2中HT質粒酶切位點如圖所示，C1酶基因以B鏈為轉錄模板鏈，克隆C1酶基因時在其酶切位點1和酶切位點2兩端分別添加 BamHIBamHI和 SmaISmaI，并且二者順序不能調換的原因是 轉錄時mRNA自身延伸方向是5’→3’，使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質粒連接轉錄時mRNA自身延伸方向是5’→3’，使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質粒連接。
（5）預期該工程菌在處理廢棄物以保護環境方面可能的應用 降解桔桿，減少桔桿燃燒帶來的空氣污染降解桔桿，減少桔桿燃燒帶來的空氣污染。（舉一例）
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】脫氧核苷酸；RNA聚合酶；小；試劑盒中的原料、引物和探針數量一定，超出一定循環數后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加；BamHI；SmaI；轉錄時mRNA自身延伸方向是5’→3’，使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質粒連接；降解桔桿，減少桔桿燃燒帶來的空氣污染
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/6 8:0:9組卷：7引用：1難度：0.6
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1．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7