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          讓番茄不再在寒風中瑟瑟發抖
          生活在寒溫帶的“美洲叔蝶”冷水魚,能產生大量的抗凍蛋白??蒲腥藛T利用其抗凍基因,培育出抗凍番茄植株,幼苗在哈爾濱的致死溫度下降2度。其研發技術路線如圖(其中amp'為氨芐青霉素抗性基因)。

          (1)按受體細胞分,此案例屬于
          植物
          植物
          基因工程。
          小柴查閱相關資料,決定采用SmaⅠ和PstⅠ兩種限制酶切割獲得抗凍基因和切開質粒,以期在步驟①高效獲得重組質粒。
          (2)小柴查閱到的資料是:
          SmaⅠ和PstⅠ兩種限制酶切割DNA片段后獲得的黏性末端不同(或不互補)
          SmaⅠ和PstⅠ兩種限制酶切割DNA片段后獲得的黏性末端不同(或不互補)
          ;此種獲得目的基因的方法稱為
          直接從體細胞中分離
          直接從體細胞中分離

          小柴用上題方法獲得含抗凍基因的重組質粒后,進行如下實驗切割原質粒和重組質粒,獲得片段大小如表(1kb=1000bp) (注意:DNA 片段大小與圖中所畫比例一致)
          限制酶 AluⅠ SmaⅠ和PstⅠ
          原質粒 7.7kb 2.3kb、5.4kb
          重組質粒 3.0kb、4.8kb
          (3)分析數據,計算可得魚抗凍基因的長度為
          2.4kb
          2.4kb
          ,若不考慮終止密碼子,抗凍蛋白由
          800
          800
          個 氨基酸組成。
          (4)步驟②為
          重組質粒(重組DNA)導入受體細胞
          重組質粒(重組DNA)導入受體細胞
          ,導入前番茄細胞應具有的特點是
          D
          D

          A.無amp',有抗凍基因
          B.有amp',有抗凍基因
          C.有amp',無抗凍基因
          D.無amp',無抗凍基因
          (5)步驟③表示植物組織培養的
          脫分化和再分化
          脫分化和再分化
          過程。
          (6)若抗凍基因整合進二倍體番茄細胞的某一條染色體上(基因型記為Aa)則以下對抗凍番茄進行處理后獲得的后代一定保留有抗凍基因的是
          AB
          AB

          A.營養繁殖
          B.植物組織培養
          C.自交
          D.與普通番茄(aa)雜交

          【考點】植物的組織培養
          【答案】植物;SmaⅠ和PstⅠ兩種限制酶切割DNA片段后獲得的黏性末端不同(或不互補);直接從體細胞中分離;2.4kb;800;重組質粒(重組DNA)導入受體細胞;D;脫分化和再分化;AB
          【解答】
          【點評】
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