為研究血清及EVO（吳茱萸堿）對細胞增殖的影響及作用機制，科研人員做了以下實驗。請回答下列問題：
Ⅰ、研究不同“層次”血清對細胞增殖的影響。
科研人員將分離出的牛血清裝入專用血清瓶后放入冰箱中直立靜置一段時間。取三根刻度吸管，將血清從上到下輕輕吸成均等的三份，分別裝入消毒后的瓶中，標記為上、中、下，再分別從三個瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中，混合均勻備用。分別取等量的不同“層次”的血清和混合血清加入到新配制的動物細胞培養液中，再接種小鼠上皮細胞（接種細胞密度為5×104個/mL），在適宜條件下培養72h后，進行計數，結果如表。
| 組別 | 上 | 中 | 下 | 混 |
| 72h細胞數/個mL-1 | 9.75×104 | 1.04×105 | 7.5×104 | 1.85×105 |
維持培養液的pH
維持培養液的pH
。（2）培養液中加入動物血清的作用是
提供細胞生存和增殖所必需的生長調節因子
提供細胞生存和增殖所必需的生長調節因子
，還加入一定量抗生素的目的是 防止細菌生長
防止細菌生長
。吸取血清過程中，要嚴格禁止震動和搖晃，目的是 防止不同層次血清混合
防止不同層次血清混合
。（3）如果用血細胞計數板計數細胞時進行如圖1所示的操作，統計出來的數據比實際值偏
大
大
。
（4）從表中結果可以看出，不同“層次”的血清對細胞增殖的影響不同。造成這種結果的主要原因是
不同“層次“血清中營養成分不同
不同“層次“血清中營養成分不同
。（5）根據實驗結果，在動物細胞培養過程中，正確使用血清的方法是
將血清充分混勻后再加入到培養液中
將血清充分混勻后再加入到培養液中
。Ⅱ、檢測EVO對人胃癌細胞BGC-823增殖的影響。
（1）①用含動物血清的DME/F-12培養基置于恒溫培養箱中培養BGC-823。
②取出上述培養的細胞，加入胰蛋白酶制成單細胞懸液，置于加入不同濃度EVO的多孔板中進行培養。
③EVO對BGC-823細胞增殖影響的實驗結果如圖2。
實驗結果表明
在一定范圍內，隨著EVO濃度的升高，對BGC-823細胞增殖的抑制作用加強
在一定范圍內，隨著EVO濃度的升高，對BGC-823細胞增殖的抑制作用加強
。（2）檢測EVO對BGC-823細胞周期和細胞凋亡相關蛋白表達的影響，結果如圖3。根據上述實驗，可判斷是
p53
p53
細胞周期抑制蛋白，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結合，抑制其轉錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行。細胞凋亡蛋白Caspase-3表達量。（3）綜上所述，推測EVO對人胃癌細胞的作用機制是
EVO促進細胞周期抑制蛋白的合成，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結合，抑制其轉錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行
EVO促進細胞周期抑制蛋白的合成，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結合，抑制其轉錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行
。【考點】動物細胞培養的條件與過程．
【答案】維持培養液的pH；提供細胞生存和增殖所必需的生長調節因子；防止細菌生長；防止不同層次血清混合；大；不同“層次“血清中營養成分不同；將血清充分混勻后再加入到培養液中；在一定范圍內，隨著EVO濃度的升高，對BGC-823細胞增殖的抑制作用加強；p53；EVO促進細胞周期抑制蛋白的合成，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結合，抑制其轉錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：2難度：0.6
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1．動物細胞培養和植物組織培養是細胞工程的基本技術，下列關于這兩項技術的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
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（1）從患者體內獲得體細胞后，對其進行的初次培養稱為，培養的細胞在貼壁生長至鋪滿培養皿底時停止分裂，這種現象稱為。一般來說，動物細胞培養需要的條件有（少答出兩點）。
（2）利用PCR技術擴增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調換順序，成功獲得了速效胰島素。生產速效胰島素，需要對進行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測胰島類似細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能，可設計如下實驗：將等量的胰島類似細胞與正常胰島B細胞分別加入兩組相等濃度的培養液中，適宜且相同條件下進行培養，一段時間后分別檢測兩組培養液中。
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