EPO是促紅細胞生成素的英文簡稱,是一種激素樣物質,可促進體內新紅細胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因,并采用中國倉鼠卵巢(CHO)細胞表達系統來獲取產物,其過程如圖。請回答下列問題:

(1)從人體組織中提取EPO的mRNA,在 逆轉錄逆轉錄酶的作用下合成EPO基因的cDNA,再通過PCR技術獲得大量EPO基因,PCR的產物一般通過 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。進行擴增時需先加熱至90?95℃,后冷卻至55?60℃,以上調控溫度操作的目的分別是 使DNA雙鏈打開解為單鏈使DNA雙鏈打開解為單鏈、使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。
(2)供體母鼠通常情況下每次排卵8?12枚,為使其超數排卵,需注射 促性腺促性腺 激素以排出更多的卵子,培養到 MⅡ中MⅡ中 期與獲能的精子相遇,精子穿越透明帶,完成體外受精。
(3)①過程構建了基因表達載體,內部包括不可缺少的組成部分,其中 啟動子啟動子 能驅動基因的轉錄。切割含EPO基因的DNA與載體時通常用兩種不同限制酶的原因是 防止質粒和目的基因自身環化和反向連接防止質粒和目的基因自身環化和反向連接。
(4)采用 顯微注射顯微注射 技術,將重組表達載體導入小鼠受精卵中,將受精卵移入發育培養液中繼續培養。當胚胎發育至 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚 時期,向受體移植。
(5)若想檢驗轉基因倉鼠是否成功表達EPO,可以采用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交 技術對血液來進行檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合;體外受精和胚胎移植.
【答案】逆轉錄;瓊脂糖凝膠電泳;使DNA雙鏈打開解為單鏈;使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合;促性腺;MⅡ中;啟動子;防止質粒和目的基因自身環化和反向連接;顯微注射;桑葚胚或囊胚;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優網所有,未經書面同意,不得復制發布。
發布:2024/6/8 8:0:9組卷:121引用:1難度:0.6
相似題
-
1.下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是( )
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細胞中檢測到相應的目的基因,則說明基因工程項目獲得成功 C.蛋白質工程需構建基因表達載體,改造后的蛋白質的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過花粉傳播,從而引起基因污染 發布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內,可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
(2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據中心法則分析,其可能的原因是發布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關基因工程的敘述,正確的是( )
A.質粒上標記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細胞的DNA中才能復制 C.構建表達載體時需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7