科學(xué)家利用基因工程和細(xì)胞核移植技術(shù)培育了綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。基本流程是：從熒光水母中獲取目的基因，與有關(guān)載體重組，將其導(dǎo)入豬胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后再將成纖維細(xì)胞核植入去核的卵母細(xì)胞中，最后培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因克隆豬。
（1）成纖維細(xì)胞貼壁生長分裂到表面相互接觸時，就會停止分裂，這種現(xiàn)象叫做細(xì)胞的 接觸抑制接觸抑制。若將成纖維細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，操作時首先用 胰蛋白酶胰蛋白酶處理成細(xì)胞懸液。
（2）作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在 MⅡ/減數(shù)第二次分裂中/減數(shù)分裂Ⅱ中期MⅡ/減數(shù)第二次分裂中/減數(shù)分裂Ⅱ中期期。目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是 顯微操作去核法顯微操作去核法。將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞，通過 電融合電融合法使兩細(xì)胞融合，供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚。常通過 電刺激電刺激（物理方法）激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。
（3）培養(yǎng)重組細(xì)胞時，將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類，數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為 合成合成培養(yǎng)基，但通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的 血清血清等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的主要作用是 維持培養(yǎng)液的pH維持培養(yǎng)液的pH。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量 抗生素抗生素。
【考點(diǎn)】動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程；動物細(xì)胞核移植技術(shù)．
【答案】接觸抑制；胰蛋白酶；MⅡ/減數(shù)第二次分裂中/減數(shù)分裂Ⅱ中期；顯微操作去核法；電融合；電刺激；合成；血清；維持培養(yǎng)液的pH；抗生素
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/5/16 8:0:9組卷：6引用：2難度：0.7
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1．動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細(xì)胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項(xiàng)技術(shù)的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動物克隆和胚胎工程有關(guān)的問題：
（1）幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。在進(jìn)行基因工程操作時，可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動物成纖維細(xì)胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以支持生長等措施。當(dāng)?shù)谝粋€卡氏瓶中的細(xì)胞濃度不再增加時，若要細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯誤的是
A．在動物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
B．若在囊胚期進(jìn)行胚胎分割，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，滋養(yǎng)成則不必
C．可以從雌性動物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)成熟
D．胚胎成纖維細(xì)胞可以用于胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)，因?yàn)槠淠芊置谝种萍?xì)胞分化的物質(zhì)。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：4引用：1難度：0.7 -
3．據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù)，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請回答下列問題：
（1）從患者體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂，這種現(xiàn)象稱為。一般來說，動物細(xì)胞培養(yǎng)需要的條件有（少答出兩點(diǎn)）。
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學(xué)家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對進(jìn)行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測胰島類似細(xì)胞是否具有胰島B細(xì)胞的正常生理功能，可設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)：將等量的胰島類似細(xì)胞與正常胰島B細(xì)胞分別加入兩組相等濃度的培養(yǎng)液中，適宜且相同條件下進(jìn)行培養(yǎng)，一段時間后分別檢測兩組培養(yǎng)液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優(yōu)點(diǎn)是。發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
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