亞麻酸（ALA）能夠促進(jìn)卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育．為了給水牛體外胚胎產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中合理使用亞麻酸提供理論依據(jù)，科研人員研究了不同濃度的亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟、早期胚胎發(fā)育的影響，分析回答：
①卵母細(xì)胞的收集和體外培養(yǎng)：從屠宰場(chǎng)水牛的卵巢中收集并處理卵母細(xì)胞，隨機(jī)分成5組，分別置于不同濃度亞麻酸的培養(yǎng)液中，在的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22-24h.
②卵母細(xì)胞成熟判斷：在顯微鏡下觀察卵母細(xì)胞，判斷其是否成熟，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1．
③體外受精：在受精溶液中進(jìn)行體外受精后，用顯微鏡觀察判斷是否完成受精．
④早期胚胎培養(yǎng)：將受精卵移入胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)44-48h后檢查分裂情況，每隔48h更換一次培養(yǎng)液，第5-9天觀察囊胚發(fā)育情況，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表2．
表1亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響

ALA濃度/μmol?L-1	卵母細(xì)胞數(shù)	核成熟卵子數(shù)
0	229	137
10	201	133
50	227	166
100	215	137
200	215	135

表2亞麻酸對(duì)水牛早期胚胎發(fā)育的影響

ALA濃度/μmol?L-1	培養(yǎng)卵數(shù)	分裂數(shù)	囊胚數(shù)
0	309	171	75
10	325	182	82
50	292	185	97
100	310	188	84
200	231	145	68

（1）步驟①中，細(xì)胞培養(yǎng)箱中加5%CO₂的作用是

維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定

維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定

．
（2）步驟②中，成熟卵母細(xì)胞內(nèi)染色體的行為特征是

染色體的著絲點(diǎn)排列在赤道板上

染色體的著絲點(diǎn)排列在赤道板上

，步驟③中，判斷是否受精的依據(jù)是

在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可否規(guī)察到兩個(gè)極體

在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可否規(guī)察到兩個(gè)極體

．
（3）步驟④中，受精卵經(jīng)過(guò)

卵裂期、桑葚胚

卵裂期、桑葚胚

（時(shí)期）發(fā)育成囊胚，培養(yǎng)過(guò)程定期更換培養(yǎng)液的目的是

清除有害代謝產(chǎn)物，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

清除有害代謝產(chǎn)物，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

．
（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol?L^-1時(shí)，對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育起

促進(jìn)

促進(jìn)

作用．
（5）本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，

50μmol?L^-1

50μmol?L^-1

的亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利，其判斷依據(jù)是

核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例較高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例較高

核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例較高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例較高

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