藍舌病是由藍舌病病毒（BTV）引起的感染牛、羊等家畜的烈性傳染病。BTV病毒的核酸由雙鏈RNA構成，可編碼7種結構蛋白和5種非結構蛋白（只在被感染的細胞中表達）。研究人員將編碼病毒的這些蛋白基因導入圖1所示pUC18質粒中，用于制備相關疫苗的研究。請據圖和所學知識回答問題：
注：圖1為pUC18質粒（2.7kb），圖2為質粒B（2.7kb），EcoRⅠ（0.6kb）、PvuⅠ（0.8kb）為限制酶及其切割位點與復制原點之間的距離。已知1kb=1000個堿基對。
（1）pUC18質粒為環狀DNA分子，為了能成功構建重組DNA分子，需要先通過 逆轉錄逆轉錄的方法獲得目的基因，再用 PCRPCR技術擴增。在建立基因文庫的過程中須將含有目的基因的質粒導入 受體菌受體菌中儲存。
（2）基因工程的核心步驟是構建基因表達載體構建基因表達載體。將圖1的目的基因和圖2所示質粒連接后，得到圖3中三種方式。為選出正向連接的重組質粒，使用限制酶 EcoRⅠEcoRⅠ對重組質粒完全酶切后進行電泳分析，若是正向連接載體，結果會出現長度為 1.21.2Kb和 5.55.5Kb兩種DNA分子。
（3）重組病毒載體疫苗是以減毒病毒為載體，將抗原蛋白基因導入動物細胞并表達，進而引發免疫反應。研究人員在制備BTV重組病毒載體疫苗時不選用編碼 非結構蛋白非結構蛋白（結構蛋白/非結構蛋白）的基因作抗原基因，理由是 這些病毒蛋白僅存在于被感染的細胞中，不存在于病毒顆粒中這些病毒蛋白僅存在于被感染的細胞中，不存在于病毒顆粒中。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；PCR；受體菌；構建基因表達載體；EcoRⅠ；1.2；5.5；非結構蛋白；這些病毒蛋白僅存在于被感染的細胞中，不存在于病毒顆粒中
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：13引用：1難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6