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          螢火蟲發(fā)光是體內(nèi)熒光素酶催化一系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象。如果熒光素酶存在于植物體內(nèi),也可使植物體發(fā)光。一直以來熒光素酶的惟一來源是從螢火蟲腹部提取。但加利福尼亞大學(xué)的一組科學(xué)家成功地通過轉(zhuǎn)基因工程實現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi),并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶。請你根據(jù)已有的知識回答下列有關(guān)問題:
          (1)在此轉(zhuǎn)基因工程中,目的基因是
          熒光素酶基因
          熒光素酶基因
          ,將目的基因和質(zhì)粒“縫合”在一起的工具酶是
          DNA連接酶
          DNA連接酶
          。該酶據(jù)來源可以分為兩類,其中
          T4-DNA連接酶
          T4-DNA連接酶
          既可以“縫合”黏性末端,又可以“縫合”平末端。
          (2)將此目的基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi)需要載體的幫助。選取載體時必須考慮的條件是
          能夠在宿主細胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因
          能夠在宿主細胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因
          。(至少寫出兩點)。
          (3)在此基因工程中,將體外重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi),并使其在細胞內(nèi)穩(wěn)定保存和表達的過程稱為
          轉(zhuǎn)化
          轉(zhuǎn)化
          。最常用的方法是首先用
          Ca2+
          Ca2+
          處理大腸桿菌得到
          感受態(tài)
          感受態(tài)
          細胞。
          (4)目的基因是否導(dǎo)入受體細胞,用
          DNA分子雜交
          DNA分子雜交
          技術(shù)來檢測。目的基因是否表達出相應(yīng)的蛋白質(zhì),除了通過大腸桿菌是否發(fā)光來確定外,還可以通過
          抗原—抗體
          抗原—抗體
          特異性反應(yīng)來判斷。

          【答案】熒光素酶基因;DNA連接酶;T4-DNA連接酶;能夠在宿主細胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因;轉(zhuǎn)化;Ca2+;感受態(tài);DNA分子雜交;抗原—抗體
          【解答】
          【點評】
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          發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:2難度:0.7
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            發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
          • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題:
            (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
             
             

            (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
             
            。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
             
            。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
             

            (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
             
             
            ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
             
            。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
             

            (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
             

            (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
             

            發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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